Лечение от сифилиса по реакции вассермана


Анализ на сифилис является одним из самых распространенных среди лабораторных исследований. Широко используются анализы на сифилис при проведении профилактических обследований. При помощи микроскопии выявляется возбудитель сифилиса — бледная трепонема. При помощи серологических реакций подтверждается диагноз сифилиса, устанавливается диагноз скрытого сифилиса, проводится контроль эффективности лечения, определяется излеченность больных.

Диагноз сифилиса устанавливается на основании клинических данных, обнаружении возбудителей сифилиса в образцах материала и подтверждении диагноза серологическими методами исследования. Проявления сифилиса многочисленны и многообразны, ввиду чего болезнь выявляется врачами разных специальностей. Дифференциальная диагностика первичного сифилиса проводится с целым рядом заболеваний.

Рис. 1. На фото первичное проявление сифилиса — твердый шанкр.

При заражении сифилисом в организме больного образуются антитела. Серологическая диагностика помогает врачу изучать динамику образования антител в организме больного сифилисом в начальных стадиях заболевания, в период лечения и после его окончания, решить вопрос рецидив заболевания у больного или повторное заражение (реинфекция), поставить диагноз сифилиса при массовых медицинских условиях.

Первыми после заражения начинают вырабатываться антитела IgM. Они начинают выявляться при помощи серологических реакций уже со второй недели после заражения. На 6 — 9 неделях заболевания их количество становится максимальным. Если больной не лечился, то антитела исчезают через полгода. Антитела IgM исчезают через 1 — 2 мес. после лечения раннего сифилиса, через 3 — 6 мес. — после лечения позднего сифилиса. Если регистрируется их рост, то это служит признаком рецидива сифилиса или говорит о повторном заражении. Молекулы IgM крупные и через плаценту к плоду не переходят.

Антитела иммуноглобулины IgG появляются в конце первого месяца (на 4-й неделе) от момента заражения. Их титр выше, чем титр IgM. IgG сохраняются после излечения достаточно длительное время.

Существует множество серологических реакций. Это объясняется антигенной множественностью бледных трепонем. В сыворотке крови больного человека на разных стадиях сифилиса кроме специфических образуются те или иные неспецифические антитела — агглютинины, комплементсвязывающие, иммобилизины, антитела, вызывающие иммунную флюоресценцию, преципитины и др. Серологические реакции по выявлению неспецифических антител обладают относительной специфичностью поэтому, чтобы избежать диагностических ошибок, следует пользоваться не одним, а комплексом серологических реакций (КСР).

Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций. Антитела-реагины, которые вырабатываются в крови человека против кардиолипинового антигена, регистрируются не только при сифилисе, но и при других заболеваниях: коллагенозах, гепатитах, заболеваниях почек, тиреотоксикозе, онкозаболеваниях, при инфекционных заболеваниях (лепра, туберкулез, бруцеллез, малярия, сыпной тиф, скарлатина), при беременности и месячных циклах, при приеме жирной пищи и алкоголя. Отмечено, что с возрастом количество ложноположительных реакций возрастает.

Рис. 2. На фото первичный сифилис у женщин.

Серологические тесты на сифилис подразделяются на трепонемные и нетрепонемные.

В качестве антигена в этой группе тестов используется кардиолипиновый антиген. Липидные антигены возбудителей сифилиса самые многочисленные. Они составляют 1/3 сухой массы клетки. С помощью нетрепонемных тестов выявляются антитела-реагины, которые вырабатываются против кардиолипинового антигена. В эту группу входит реакция связывания комплемента (РСКкард), реакция микропреципитации (РМП), реакция быстрого определения реагинов плазмы (RPR) и др. С помощью нетрепонемных тестов проводится первичный скрининг на сифилис (обследование групп населения), а возможность получения результатов в количественном варианте позволяет использовать эти тесты с целью контроля эффективности лечения. Положительные результаты нетрепонемных тестов должны подтверждаться трепонемными тестами. Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций.

В трепонемных тестах используются антигены трепонемного происхождения, выделенные из культуры бледных трепонем. С их помощью подтверждаются положительные результаты нетрепонемных тестов. В группу входят: РСКтреп — реакция связывания комплемента, РИФ — реакция иммунофлюоресценции и ее модификации, РИТ, РИБТ — реакция иммобилизации бледных трепонем, РПГА — реакция пассивной гемагглютинации, ИФА — иммуноферментный анализ.

Антигены для данной группы тестов получают генно-инженерным путем и используют в реакциях — РПГА и ИФА, в анализах иммуноблоттинга (ИБ) и иммунохроматографическом анализе.

Рис. 3. Для диагностики сифилиса используется комплекс серологических тестов.

Для выявления сифилиса используются нетрепонемные тесты или комплекс серологических реакций (КСР). Серологическая диагностика применятся с 5-й недели от момента заражения или с 2-3 недели после появления твердого шанкра. Антитела выявляются практически у всех больных со свежим первичным, вторичным и рецидивным сифилисом. Серологические реакции положительные у 70 — 80% больных с третичным активным сифилисом, в 50 — 60% случаев у больных третичным скрытым сифилисом.

Серологические реакции с применением нетрепонемных тестов могут давать ложноположительные результаты.

Рис. 4. Забор крови для проведения анализа на сифилис.

Реакция Вассермана (RW, РВ), изобретенная А. Вассерманом более 100 лет назад, сегодня претерпела множество изменений, однако, как дань традиции, сохранила свое название по настоящее время. Реакция связывания комплемента с применением кардиолипинового антигена предназначена не только для выявления антител, но и выполняется в количественном варианте — с разными разведениями сыворотки, что позволяет использовать ее для контроля эффективности лечения. Низкая чувствительность и специфичность, получение ложноположительных результатов — отрицательные стороны данного вида исследования.

Суть реакции Вассермана заключается в следующем: антигены, которые применяются при постановке реакции Вассермана, в случае наличия антител к возбудителям сифилиса в крови человека посредством комплимента связываются с ними и выпадают в осадок. Интенсивность реакции обозначают знаком (+). Реакция может быть отрицательной (-) — отсутствие осадка, сомнительной (небольшой осадок или +), слабоположительной (++), положительной (+++) и резко положительной (++++).

Более чувствительной является видоизмененная реакция Вассермана — реакция Колмера. С ее помощью выявляются антитела в сыворотках, где реакция Вассермана дала отрицательный результат.

При резко положительных реакциях проводится количественное определение реагинов, для чего используется сыворотка в разведениях от 1:10 до 1: 320, что позволяет использовать данный вид исследования для контроля эффективности лечения. Например, снижение титра антител и последующая их серонегативация (получение отрицательных результатов), говорит об успешном излечении заболевания.

Рис. 5. Анализ крови на сифилис — реакция Вассермана.

Микрореакция преципитации применяется для массовых обследований отдельных групп населения, диагностики сифилиса и контроля над эффективностью лечения. Для проведения данного вида исследования необходимо небольшого количества исследуемого материала. В основе микрореакции преципитации лежит иммунологическая реакция антиген-антитело. В случае наличия антител в сыворотке крови обследуемого комплекс антиген-антитело выпадает в осадок с образованием хлопьев. Реакция проводится в лунках специальной стеклянной пластины. Оценивается по интенсивности выпавшего осадка и величине хлопьев в (+) как реакция Вассермана. При обследовании беременных, доноров и для контроля эффективности лечения не применяется. VDRL и RPR являются разновидностями микрореакций.

Рис. 6. Вид реакции преципитации в капле на стекле.

Рис. 7. Анализ крови на сифилис — реакция микропреципитации.

Рис. 8. Набор для проведения реакции быстрого определения реагинов плазмы (Тест на сифилис RPR).

Все положительные тесты, полученные при проведении неспецифических серологических реакций, требуют подтверждения специфическими реакциями — трепонемными тестами.

При проведении трепонемных тестов используются антигены трепонемного происхождения. Их отрицательной стороной является невозможность использования для контроля эффективности проводимого лечения, получение положительных результатов при спирохетозах и невенерических трепонематозах и получение ложноположительных результатов при онкологических заболеваниях, лепре, некоторой эндокринной патологии. Такие тесты, как РПГА, ИФА и РИФ остаются положительными многие годы после излечения сифилиса, а в некоторых случаях и пожизненно.

РИБТ и РИФ являются более специфическими из всех серологических реакций, применяемых для диагностики сифилиса. Они позволяют различать ложноположительные реакции, выявлять поздние формы сифилиса, протекающие с отрицательными реакциями. При помощи РИБТ распознаются ложноположительные реакции у беременных, когда необходимо решить вопрос об инфицированности ребенка.

Суть реакции заключается в том, что антитела, находящиеся в сыворотке крови больного, обездвиживают бледные трепонемы. Отрицательной считается реакция при иммобилизации до 20% возбудителей, слабоположительная — 21 — 50%, положительная — 50 — 100%. РИБТ иногда дает ложноположительные результаты. Тест сложный и трудоемкий, однако, является незаменимым при проведении дифференциальной диагностики скрытых форм заболевания и ложноположительных результатов серологических реакций, в том числе у беременных. РИБТ дает 100% положительный результат при вторичном, раннем и позднем сифилисе, в 94 — 100% случаев — при других формах сифилиса.

Суть реакции заключается в том, что бледные трепонемы (антигены), соединенные с антителами, меченными флюорохромами, издают в люминесцентном микроскопе желто-зеленое свечение. Результат оценивается знаком (+). С помощью РИФ выявляются иммуноглобулины класса А. Реакция иммунофлюоресценции становится положительной раньше, чем реакция Вассермана. Она всегда положительная при вторичном и латентном сифилисе, в 95 — 100% случаев положительная при третичном и врожденном сифилисе. Техника проведения данного вида исследования проще, чем у РИБТ, но заменить РИФ на РИБТ невозможно, так данная реакция уступает РИБТ по специфичности. РИФ-10 (модификация РИФ) более чувствительна, РИФ-200 и РИФ-абс более специфичны.

Рис. 9. Анализ крови на сифилис — реакция иммунофлюоресценции (РИФ).

Суть реакции заключается в том, что сенсибилизированные сывороткой больного бледные трепонемы в присутствии комплемента прилипают к поверхности эритроцитов. Полученные комплексы при цетрофугировании выпадают в осадок. Чувствительность данного теста и специфичность близки к РИФ и РИБТ.

С помощью ИФА определяются иммуноглобулины класса М и G. Методика IgM – ИФА может быть использована в качестве скринингового и подтверждающего теста. Чувствительность ИФА и его специфичность аналогичны РИФ. При сифилисе ИФА дает положительные результаты с третьего месяца инфицирования и довольно долго (иногда всю жизнь) остается положительным.

Рис. 10. Иммуноферментный анализатор.

РПГА основана на способности эритроцитов, на которых адсорбированы антигены бледной трепонемы, в присутствии сыворотки больного склеиваться (гемагглютинация). РПГА применяется для диагностики всех форм сифилиса, в том числе скрытого. При применении высокого качества антигена данный вид серологической реакции превышает все остальные тесты по специфичности и чувствительности.

Рис. 11. РПГА применяется для диагностики всех форм сифилиса.

Рис. 12. Анализ на сифилис — реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации (схема).

Рис. 13. Вид перевернутого зонтика, занимающего все дно пробирки, свидетельствует о положительной реакции. В случае, когда эритроциты оседают столбиком («пуговка») в центре дна пробирки говорят об отрицательной реакции.

Рис. 14. Тест РПГА в лабораторных условиях.

Наряду с серологической диагностикой методика обнаружения бледных трепонем (микробиологическая диагностика) играет важную роль, особенно в период серонегативного сифилиса, когда еще в крови отсутствуют антитела, но уже есть первые проявления свежего первичного сифилиса (твердый шанкр).

Биологическим материалом для исследования служит отделяемое с поверхности твердых язв (шанкров), содержимое пустулезных сифилидов, мокнущих и эрозивных папул, пунктаты инфицированных лимфатических узлов, ликвор и амниотическая жидкость, для проведения ПЦР — кровь.

Наилучшей методикой обнаружения возбудителей сифилиса является исследование биологического материала в темном поле микроскопа. Данная методика позволяет увидеть бледные трепонемы в живом состоянии изучить ее особенности строения и движения, отличить патогенные возбудители от сапрофитов.

Рис. 15. Анализ на сифилис — темнопольная микроскопия.

Рис. 16. При изучении сухих мазков используется окраска по Романовскому-Гимзе. Бледные трепонемы окрашиваются при этом в розовый цвет, все остальные виды спирохет — в фиолетовый.

Обнаружение бледных трепонем при микроскопии в темном поле — абсолютный критерий окончательной диагностики сифилиса.

Рис. 17. Для выявления бактерий применяется реакция иммунофлюоресценции (РИФ) — трепонемный тест. Специфический комплекс антиген- антитело при соединении со специфической сывороткой, меченной флюорохромом, в свете люминесцентного микроскопа дает свечение бактерий зеленоватым цветом.

Рис. 18. Возбудители сифилиса хорошо просматриваются в мазках, приготовленных по методике Левадити (импрегнация серебром). Бледные трепонемы темного цвета на фоне желтой окраски клеток инфицированных тканей.

Рис. 19. Возбудитель сифилиса при многократном увеличении.

Рис. 20. На фото колонии бледных трепонем. Получить культуру бактерий тяжело. Они практически не растут на искусственных питательных средах. На средах, содержащих лошадиную и кроличью сыворотки, колонии появляются на 3 — 9 сутки.

Эффективным и перспективным сегодня является методика проведения полимеразной цепной реакции. ПЦР на сифилис позволяет получить результат в течение нескольких часов, а в собранном для диагностики материале может присутствовать хотя бы несколько возбудителей заболевания.

Рис. 21. ПЦР на сифилис позволяет обнаружить ДНК или ее фрагменты бледных трепонем.

Чувствительность данного метода исследования зависит от наличия в биологическом материале бледных трепонем и достигает 98,6%. Специфичность данного теста во многом зависит от правильного выбора мишени для амплификации при проведении диагностики и достигает 100%.

Вместе с тем, в связи с недостаточно изученной сравнительной характеристики чувствительности и специфичности прямых методов диагностики сифилиса и ПЦР, данный метод обследования в РФ для диагностики заболевания пока не разрешен.

ПЦР на сифилис разрешено проводить лишь в некоторых случаях, как дополнительный метод диагностики врожденного сифилиса, нейросифилиса, при затруднениях проведения диагностики сифилиса с использованием серологических методов исследования у ВИЧ-больных.

Рис. 22. Выявление ДНК бледной трепонемы с применением ПЦР говорит либо о наличии жизнеспособных бактерий, либо об остатках погибших, но содержащих способных к образованию дополнительных копий отдельных участков хромосомной ДНК.

По материалам microbak.ru

Анализы на сифилис: виды анализов, расшифровка результатов, причины ложноположительных и ложноотрицательных результатов обследования.

Сифилис – это венерическое заболевание, возбудителем которого является бактерия Treponema pallidum (бледная трепонема). Подробнее о путях передачи сифилиса, его симптомах и возможных осложнениях читайте в статье Все о сифилисе. Симптомы и лечение.

Своевременное выявление сифилиса (с помощью специальных анализов) позволяет врачам вовремя начать лечение и предотвратить развитие опасных осложнений этой болезни.

Проведение анализов на сифилис во время беременности помогает предотвратить рождение детей с врожденным сифилисом. Подробно об анализах на сифилис во время беременности рассказано в статье Все о диагностике и лечении сифилиса во время беременности.

В подавляющем большинстве случаев у врачей нет возможности получить точные данные о сексуальной жизни пациентов (некоторые люди скрывают детали своей половой жизни или недооценивают риск заражения заболеваниями передающимися половым путем). В связи с этим, для того чтобы защитить людей от возможных последствий их собственной невнимательности или недостатка медицинских знаний, в некоторых случаях врачи назначают так называемые скрининговые анализы на сифилис (то есть анализы, которые сдают большие количества людей).

Врач может назначить вам анализы на сифилис, даже если у вас нет симптомов этой болезни, и вы уверены, что не могли им заразиться.

Необходимость проведения этих анализов связана с тем, что сифилис иногда передается бытовым путем (не через сексуальный контакт) и протекает в скрытой форме (то есть без симптомов).

  1. При устройстве на работу (работникам здравоохранения, общественного питания, военнослужащим и пр.)
  2. При становлении на учет по поводу беременности.
  3. Во время поступления в больницу, при подготовке к операциям.
  4. Донорам крови.
  5. Лицам, заключенным в местах лишения свободы.
  1. При обнаружении симптомов заболевания (обычно, это сыпь в области половых органов).
  2. При получении положительных результатов скрининговых анализов на сифилис.
  3. В случае если у вас был половой контакт с человеком, у которого был выявлен сифилис.
  4. Новорожденным детям, матери которых больны сифилисом.

Кроме того, анализы на сифилис периодически проводятся во время лечения (для того, чтобы убедиться в том, что лечение эффективно) и даже после окончания курса лечения, для контроля излеченности.

Диагностикой и лечением сифилиса занимается врач дерматовенеролог. В диагностике заболевания могут быть использованы следующие анализы:

Осмотр кожи, наружных и внутренних половых органов производится с целью выявления основных симптомов сифилиса: твердый шанкр, увеличение лимфатических узлов, высыпания на коже и пр. (см. Симптомы сифилиса)

Для того чтобы обнаружить бледную трепонему, врачи обследуют под микроскопом мазки (или соскобы), полученные из язв, лимфатических узлов, околоплодных вод у беременных и пр. Кровь под микроскопом не обследуют.

Важно: Если в ваших анализах под микроскопом была обнаружена бледная трепонема, это означает, что вы точно больны сифилисом. Но если анализы показали, что возбудитель сифилиса не обнаружен, нельзя быть полностью уверенным в том, что сифилиса нет. Для того чтобы убедиться, что вы не больны, нужно сдать дополнительные анализы, описанные ниже.

ПЦР (полимеразная цепная реакция) – это сложный и дорогостоящий метод диагностики сифилиса, который позволяет обнаружить ДНК бледной трепонемы в крови или других исследуемых материалах (околоплодные воды, спинномозговая жидкость). Если анализ ПЦР дал отрицательный результат, то, скорее всего, вы не больны сифилисом. Однако при получении положительного результата (то есть, если ПЦР обнаружил ДНК бледной трепонемы в крови), нет 100% гарантии, что вы больны. Это связано с тем, что ПЦР иногда дает ложноположительные результаты (дает положительный результат при отсутствии заболевания). Поэтому если ПЦР дал положительный результат, рекомендуется дополнительно пройти другие методы обследования на сифилис (например, реакцию иммунофлюоресценции (РИФ) и реакцию пассивной гемагглютинации (РПГА)).

Серологический анализ – это обнаружение в крови особых белков (антител), которые вырабатываются в организме человека в ответ на инфекцию. В отличие от предыдущих методов диагностики, серологические анализы обнаруживают не саму бледную трепонему, а лишь ее «следы» в организме.

Если в вашей крови обнаружены антитела к бледной трепонеме, это говорит о том, что вы либо заражены сифилисом в данный момент, либо переболели им ранее.

Серологические анализы на сифилис делятся на 2 большие группы: неспецифические и специфические тесты. Основное различие этих анализов заключается в том, что неспецифические тесты показывают положительный результат только если человек болен сифилисом в данный момент и становятся отрицательными после излечения, а специфические тесты остаются положительными даже после излечения заболевания.

Говоря другими словами, отрицательный результат неспецифического теста является некоторой гарантией того, что вы здоровы.

К неспецифическим анализам относят микрореакцию преципитации (МР) и реакцию Вассермана (РВ, RW). Эти тесты используются для скрининга на сифилис. После излечения сифилиса эти анализы становятся отрицательными у 90% людей.

Как работают эти тесты: в результате жизнедеятельности бледной трепонемы (при сифилисе) в организме погибают клетки. В ответ на разрушение клеток иммунная система вырабатывает особые белки (антитела, или иммуноглобулины). Неспецифические тесты направлены на выявление этих антител, а также подсчет их концентрации (определение титра антител).

Микрореакция преципитации (МР) и ее аналоги в некоторых странах: тест быстрых реагинов (RPR, Rapid Plasma Reagins) и тест VDRL (Venereal Diseases Research Laboratory) — это нетрепонемные тесты, которые назначаются при скрининге на сифилис.

Что обследуют: кровь (из пальца или из вены), спинномозговую жидкость.

Через какое время после заражения анализ становится положительным: как правило, через 4-5 недель после заражения.

Как оценивать результаты анализа: если анализ показал положительный результат, то есть вероятность, что вы больны сифилисом. Так как этот анализ может ошибочно давать положительные результаты, рекомендуется пройти дополнительное обследование с помощью специфических тестов, описанных ниже. Отрицательный результат указывает на отсутствие сифилиса, либо раннюю стадию заболевания (до появления антител в крови).

Как оценивать полученный титр антител: если в крови обнаружены антитела в титре от 1:2 до 1:320 и выше, это означает, что вы заражены сифилисом. При позднем сифилисе титр антител может быть низким (что оценивается как сомнительный результат).

Какие могут быть причины ложноположительных результатов: ложноположительные результаты МР встречаются примерно в 2-5% случаев, вот их возможные причины:

  1. Системные заболевания соединительной ткани (системная красная волчанка, склеродермия, ревматоидный артрит, дерматомиозит, васкулиты и пр.)
  2. Инфекционные заболевания: вирусные гепатиты, инфекционный мононуклеоз, туберкулез, некоторые кишечные инфекции и пр.
  3. Воспалительные заболевания сердца (эндокардит, миокардит).
  4. Сахарный диабет.
  5. Беременность.
  6. Недавно проведенная вакцинация (прививание).
  7. Употребление алкоголя, наркотиков и др.
  8. Перенесенный ранее и излеченный сифилис (примерно у 10% людей, прошедших курс лечения, анализ МР может оставаться положительным всю жизнь).

Какие могут быть причины ложноотрицательных результатов: анализ может ошибочно показать отрицательный результат, если в крови содержится много антител, если анализ взят на ранней стадии заболевания до появления антител, либо при позднем сифилисе, когда в крови остается мало антител.

Реакция Вассермана (РВ, RW) — это нетрепонемный тест, который используется для скрининга на сифилис в странах СНГ.

Что обследуют: кровь (из пальца или из вены), спинномозговую жидкость.

Через какое время после заражения анализ становится положительным: как правило, через 6-8 недель после заражения.

Как оценивать результаты анализа: «-» — отрицательная реакция, «+» или «++» это слабоположительная реакция, «+++» это положительная реакция, «++++» это резко положительная реакция. Если реакция Вассермана показала хотя бы один плюс, то вам необходимо сдать дополнительные анализы на сифилис. Отрицательная реакция не является гарантией того, что вы здоровы.

Как оценивать полученный титр антител: титр антител от 1:2 до 1:800 говорит о наличии сифилиса.

Какие могут быть причины ложноположительных результатов: реакция Вассермана может ошибочно дать положительный результат по тем же причинам, что и микрореакция преципитации (МР), а также, если незадолго до сдачи крови на анализ вы пили алкоголь или употребляли жирную пищу.

В связи с большим количеством ошибочных результатов Реакция Вассермана (РВ, RW) используется все реже и заменяется другими, более достоверными методами диагностики.

Неспецифические тесты (микрореакция преципитации (МР) и реакция Вассермана (РВ, RW)) являются хорошими методами диагностики сифилиса. Отрицательный результат обследования с большой вероятностью указывает на то, что вы здоровы. Но при получении положительных результатов этих анализов необходимо дополнительное обследование с помощью специфических (трепонемных) тестов.

К трепонемным тестам относят следующие анализы: реакция иммунофлюоресценции (РИФ), иммуноблотинг, реакция пассивной агглютинации (РПГА), реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ), иммуноферментный анализ (ИФА).

Специфические тесты назначают людям, у которых выявлены положительные результаты микрореакции преципитации (МР) или реакции Вассермана (РВ). Специфические тесты остаются положительными еще долгое время после излечения сифилиса.

Как работают эти тесты: при попадании в организм возбудителей сифилиса иммунная система вырабатывает антитела, направленные на борьбу с бледной трепонемой. Эти антитела появляются в крови не сразу после заражения, а лишь спустя несколько недель. Примерно в конце второй недели после заражения в крови появляются антитела класса IgM. Антитела этого класса указывают на недавнее заражение сифилисом, однако в отсутствие лечения они сохраняются в крови в течение нескольких месяцев и даже лет (при этом их количество постепенно снижается). Через 4-5 недель после заражения сифилисом в крови начинают определяться антитела другого класса – IgG. Антитела этого типа сохраняются в крови в течение многих лет (иногда в течение всей жизни). Трепонемные тесты позволяют выявить наличие в крови антител (IgM и IgG), направленных на борьбу с бледной трепонемой.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) или Fluorescent Treponemal Antibody (FTA, и его разновидность FTA-ABS) — это трепонемный тест, который применяется для подтверждения диагноза сифилиса на самых ранних стадиях (даже до появления первых симптомов).

Что обследуют: кровь из вены или из пальца.

Через какое время после заражения анализ становится положительным: как правило, через 6-9 недель.

Как оценивать результаты анализа: Результаты анализа выдаются в виде минуса или плюсов (от одного до четырех). Если в анализе стоит минус, значит антитела не выявлены, и вы здоровы. Наличие одного плюса и более говорит о наличии сифилиса.

Какие могут быть причины ложноположительных результатов: ложноположительные результаты встречаются редко, однако ошибки возможны у людей с заболеваниями соединительной ткани (системная красная волчанка, дерматомиозит и пр.), у беременных и пр.

Реакция пассивной агглютинации (РПГА), или Treponema pallidum hemagglutionation assay (TPHA) – это специфический тест, который применяется для подтверждения диагноза сифилиса практически на любой его стадии.

Что обследуют: кровь из вены или из пальца.

Через какое время после заражения анализ становится положительным: как правило, уже через 4 недели.

Как оценивать результаты анализа: положительный результат РПГА указывает на то, что вы больны сифилисом, либо здоровы, но перенесли эту болезнь в прошлом.

Как оценивать полученный титр антител: в зависимости от титра антител можно ориентировочно предположить давность заражения сифилисом. Вскоре после первого попадания трепонемы в организм титр антител, как правило, менее 1:320. Чем выше титр антител, тем больше времени прошло от момента заражения.

Иммуноферментный анализ (ИФА), или Enzyme ImmunoAssay (EIA), или ELISA (Еnzyme Linked ImmunoSorbent Assay) – это трепонемный тест, который применяется для подтверждения диагноза и определения стадии сифилиса.

Что обследуют: кровь из вены или из пальца.

Через какое время после заражения анализ становится положительным: уже через 3 недели после инфицирования.

Как оценивать результаты анализа: положительный результат ИФА указывает на то, что вы больны сифилисом, либо перенесли это заболевание ранее. Этот анализ может оставаться положительным и после излечения.

Определение давности заражения сифилисом с помощью ИФА: в зависимости от того, какие классы антител (IgA, IgM, IgG) обнаружены в крови, можно предположить давность заражения.

По материалам polismed.ru

Если найден первый симптом заболевания, это свидетельствует о том, что уже около 30 дней вирус находится в организме

После 3 или 4 недель инфицирования в месте проникновения трепонем образуется шанкр, твердый на ощупь. Он может расположиться по всему телу на слизистых оболочках: губы, рот, половой член, шейка матки и влагалище. Размеры достигают 5 сантиметров. Начальные внешние проявления — пятнышко маленького размера, позже оно перерастает в эрозию или же язву. Цвет варьируется от розоватого до красного. Болезненности не приносит.

Шанкр на губах напоминает герпес. Разница в том, что нет жжения, и шанкр не проходит так быстро, как вирус герпеса. На внешних половых органах шанкр уплотнен, не причиняет неприятных ощущений. Две недели шанкр растет, после чего ткань, пораженная вирусом пополняется новыми клетками. На месте возникает пятно пигментное, рубцуется и через 2 месяца исчезает, не оставляя следа после себя. У 50% заболевших подобный шанкр на теле не один, их может быть несколько:

  • На 5-6 неделе инфицирования заболевание принимает другие формы. После появления твердого шанкра лимфоузлы увеличиваются в размере и при этом остаются безболезненными. В них попадает возбудитель сифилиса, это и есть причиной реакции такой. При пальпации лимфоузлы подвижны.
  • На 6-8 неделе заболевания в анализе крови уже определяются антитела к самому возбудителю. Мало у кого в этот период кровь может не дать положительный результат. У большинства диагноз подтверждается. Раньше по крови невозможно было определить наличие сифилиса.
  • 9-11 неделя характеризуется заживанием шанкра, постепенного исчезновения лимфаденита. Также начинается суставная боль, выпадение волос, температура и слабость. Иногда же сифилис протекает бессимптомно.

Основные проявления третичного сифилиса — это бугорки сифилиды. Они могут развиться даже в подкожно-жировой клетчатке, находиться как в самой коже, так и над поверхностью. Если они на коже, поверхность характеризуется гладкостью, блестящей структурой. Цвет меняется от красного до синюшного, границы четко очерченные, никогда не сливаются друг с другом. Всего на теле их находится максимум 10 штук.После острой стадии кожа на местах рубцуется.

Могут возникать гуммы — абсолютно безболезненные узлы высокой плотности с очерченными границами высыпают менее 3 узелков. Область распространения — бедра, рот, зев, глотка и гортань. Речь нарушается, возникают проблемы с приемом пищи. Если гуммами поражена носовая перегородка, утрудненное дыхание. Сифилиды не поражают на третичной стадии слизистые половой системы.За консультацией по анализам нужно обратиться к специалисту.Анализ крови позволяет найти антитела к трепонеме бледной, которая является возбудителем инфекции.

Поводом для проверки может стать предоперационная подготовка, неконтролируемые половые связи, беременность в планах, возникновение язв на половых органах и обильные выделения разной структуры, сыпь на коже или слизистой, а также боли в костях. Можно также проходить обследование в целях профилактики.

К исследованию нужно подготовиться. Анализы же сдаются натощак, советуется не есть около 12 часов, можно лишь воду

Диагностирование начинается с посещения врача. Первое посещение врача-венеролога проходит в сборе анамнеза у больного. Имеет значение время последнего полового акта, здоровье и уверенность в партнере, наличие высыпаний ранее, изменение слизистых, области вокруг ануса, происходит ощупывание высыпаний и лимфоузлов. В случае если диагноз понятен уже на первом осмотре врача, специалист назначает исследования выделений и крови пациента.

Исследование бактериоскопического типа — это микроскопическое исследование материала, взятого у пациента. Бледная трепонема из-за своего строения видна не очень хорошо с помощью микроскопа светового. В этом случае используется метод микроскопии темнопольной, который широко используется для обнаружения сифилиса.

На начальном этапе заболевания проходит исследование жидкости из образований эрозивного характера, которая находятся на шейке матки, половых органах, слизистой рта. Берется еще забор жидкости из лимфоузла пункцией. На второй стадии заболевания материал забирают из язв на коже и слизистых оболочек. Для диагностики заболевания врожденного околоплодные воды используют как исходный материал.

Бледная трепонема имеет длинный тонкий жгут в форме спирали, с завитками до 12 штук — вот как выглядит. Ведет себя она подвижно, может вращаться вокруг оси, и производить прочие движения. На средине тела — излом. Это отличает трепонему — возбудителя сифилиса от других трепонем. Темнопольную микроскопию могут провести повторно, если в первый раз диагноз не подтвердился.

Микроскопическое исследование, диагностика работает на первичной и второй стадии заболевания, при повторном случае заболевания и при врожденном сифилисе на раннем его этапе. Если трепонемы отсутствуют, то это не означает, что заболевания сифилис нет. Это может значить, что пациент принимал противосифилисные препараты или проходил лечение. Также может быть, что очаговая инфекция присутствует долгое время. По ошибке специалиста материал мог быть взят и исследован неправильным образом.

На сегодняшний день методы диагностики делятся на два вида — трепонемные и нетрепонемные. Трепонемные исследования подтверждают присутствие возбудителя болезни. А нетрепонемные отбирают наиболее вероятные возбудители. Сифилис как болезнь проходит сложно, клинические данные размыты и проявляются не во всех случаях. Для того, чтобы выявить возбудителя с наибольшей вероятностью проводят сразу несколько тестов. Если визуально трепонема бледная найдена, диагноз сразу ставится и проведение дальнейших тестов не имеет необходимости.

Исследования нетрепонемные — отборочные исследования не дорогие и могут охватить большое количество пациентов, а результаты доступны довольно быстро, после их проведения. Но если картина заболевания смазана или чувствительность слишком низка, проводить их не имеет смысла. Полной уверенности в результате исследования быть не может.

В отличие от тестов, трепонемные исследования более дорогостоящие, проводятся они в сложном порядке, и используются для полной уверенности в полученных утвердительных результатах при отборочных исследованиях.

При третьей стадии заболевания такие тесты могут абсолютно подтвердить диагноз. Если же сифилис переходит в хроническую форму, чувствительность сильно снижается к тестам подобного рода. Для хронического сифилиса скоро будут использовать метод полимеразной цепной реакции.
Развитие новых технологий, исследований в иммунологии или биологии молекулярной стимулирует появление новых тестов для проведения диагностики заболевания. Например, это иммуноферментный анализ.

В материале для исследований, при проведении отборочных нетрепонемных тестов находятся антитела, которые хорошо реагируют с антигеном лецитиновым. Антигенами выступают холестерин, лецитин, кардиолипин.


В США, например, пользуются четырьмя отборочными методами, которые можно разделить на методы, визуально способные определить реакции и считывание результатов микроскопически.

Нетрепонемные методы диагностики — иммуноферментный непрямой анализ при помощи кардиолипина в роли антигена. В странах СНГ отборочным тестом является взаимодействие инактивированной сыворотки с плазмой и реакция связывания кардиолипина с комплиментом.
Абсолютно все отборочные методы схожи между собой. Стоимость их невысока, проводить их быстро и очень просто. Такие виды тестов абсолютно не предназначены для выявления сифилиса на первой его стадии и при сифилисе скрытой формы. При нетрепонемном тесте антитела в организме начинают идентифицировать себя только через месяц после инфицирования трепонемой. У пациентов, которые проходили лечение первой стадии болезни, около года отборочные тесты нетрепонемные дают негативный результат.

Трепонемные тесты проводятся, если анализы дали негативный результат, но клиника подозревает наличие у больного сифилиса. После полного выздоровления у большинства вылечившихся — 80% заметна положительная реакция при проведении тестов. Такие исследования не проводятся в качестве профосмотров у прошедших курс лечения людей.

В целом, серологическая диагностика сифилиса означает стандартные реакции — реакции Вассермана, с антигеном трепонемным и кардиолипином. Групповые трепонемные реакции — иммунофлюоресценции и прилипания иммуного. Существуют также протеиновые иммобилизационные реакции трепонем, РИФ — абс, реакция гемаглюцинации пассивной.

Использование серологических реакций вместе даст шанс выявить сифилис на самых ранних порах.
Реакцией Вассермана называют метод комплементарного связывания. Антигеном в реакции выступают экстракты из бледных трепонем, экстракт, приготовленный из мышцы сердца быка — кардиолипин. Если в исследуемом материале оказалось большое количество бледных трепонем, тем выше степень заболевания. Например:

  1. отрицательная;
  2. сомнительная;
  3. слабоположительная;
  4. положительная;
  5. резкоположительная.

Реакция Вассермана проводится с реакциями осадка. Природа иммунологическая реакций осадка такая же. Но для осадочных реакций типа Закс-Витебского нужны насыщенные антигены, которые при начале реакции дадут наибольший осадок. Первичный серонегативный сифилис присутствует, если обычные реакции серологические дали негативный результат. Нахождение сифилиса вышеизложенной реакцией очень результативно при вторичном сифилисе, тогда результаты на 100% правильны.

Третья стадия активного сифилиса дает правильные результаты у более 50% больных. Но если стадия уже третья и поражены внутренние системы и органы, результаты верны у половины заболевших. Почти всегда серологическое исследование сифилиса дает положительный результат у больных с диагнозом ранний врожденный сифилис. А с поздним сифилисом врожденным — около 80%.

Иммунофлуоресцентная реакция выявляет антитела, которые помечают флуоресцентным раствором. С их помощью в лучах лампы кварцевой выявляются соединенные антитела. Это высокочувствительная реакция и заболевание можно выявить на первой стадии. Таким же образом выявляется заболевание на поздних сроках и то, что протекает латентно. Реакция РИФ-200 помогает найти скрытый вид заболевания, но окончательный диагноз может прозвучать только после всех клинических анализов. Но такая реакция исключается для тех пациентов, которые прошли полный курс лечения.

В ней трепонемы прилипают к эритроцитам и выпадают в осадок. Предварительно трепонемы сенсилибирированны сывороткой:

Эта реакция очень похожа на две предыдущие и проводится только в случаях, если в результате анамнеза или клинических исследований заболевание не подтверждается, для контролирования после начала лечения и подтверждения результатов КСР.

Иммобилизация бледных трепонем — это реакция означает потерю подвижности трепонем, при наличии испытуемой сыворотки и комплемента активного. Такая реакция применяется для распознавания скрытого сифилиса, для исследования у беременных с подозрением на серорезистентный сифилис. Минус этой реакции — дорогая стоимость и характеризуется сложным процессом. Данные иммобилизации бледных трепонем такие:

  • отрицательная — до 20%;
  • сомнительная -21-30%;
  • слабоположительная -31-50%;
  • положительная -51-100%.

Так как иммобилизины возникают в крови позже остальных антител, то реакция также становится положительной позже, чем в других реакциях на выявление заболевания. На первом этапе можно увидеть либо отрицательную либо слабоположительную реакции. На второй стадии реакция положительна у 60% испытуемых. При повторении заболевания на второй стадии реакция положительна у 90%. На третичной стадии реакция с положительным знаком почти у всех больных.

Если больной страдает сифилисом и не лечился, то реакция даст утверждающий результат в любом случае.

Эта реакция довольно чувствительна и специфична. Диагностируют ею латентный сифилис в случаях, когда проведено определенное количество тестов, а они показывают негативный результат. И если клиника настаивает на диагнозе, проводят данную реакцию.

Гемагглютинационная реакция способна определить антитела специфического типа к трепонеме бледной. Реакция характеризуется специфичностью, и результаты в большинстве своем верны.

Иммуноферментный анализ самый специфичный в обнаружении сифилиса. Преимущества — не слишком дорогая стоимость, проведение довольно легкое, высокая точность конечного результата, что дает возможность выявление заболевания на самой ранней стадии.
Метод иммуноблотинга — анализ в сочетании с электрофорезом. Довольно специфический анализ.

Один из методов это полимеразная цепная реакция. Проводится для установления диагноза у больных при латентном течении самой инфекции. При этой реакции возбудителя находят сразу. Генетический материал, предоставленный для исследований, делится при помощи ДНК (проще обнаружить возбудителя). Также такую реакцию используют при нейросифилисе, врожденном заболевании при первой стадии заболевания сифилис и для установления диагноза ВИЧ- инфицированных.

Проводят также исследование жидкости спинного мозга. В случае если существуют поражения нервной системы на стадии первой заболевания. Проводить его обязательно до начала лечения. Также пациенты с нейросифилисом на последней стадии при латентной форме могут сами обозначить диагноз.

Использование разных видов реакций серологических с целью обнаружить сифилис ведет к симбиозу разных, как отрицательных, так и положительных результатов. Нужно учитывать внешние проявления вируса и данные опроса пациента. Если реакция окажется неаргументированной положительной необходимо повторно обследовать пациента. Новая серологическая сифилиса возможна уже через 4-6 недель.

По материалам veneradoc.ru

Реакция Вассермана является основой для диагностики такого заболевания как сифилис. Классический вариант этого исследования не применяется в РФ с 1980-х годов, однако заложенная основа используется в аналогах.

Сифилис – это заболевание инфекционной этиологии, которое вызывает Treponema pallidum (бледная трепонема). Инфицирование сифилисом происходит преимущественно половым путем, также возможна вертикальная передача инфекции (при родах от зараженной матери ребенку).

Течение заболевания характеризуется постоянным прогрессированием, наличием рецидивов, периодичностью клинической симптоматики и способностью поражать все органы и системы организма.

Для диагностики сифилиса используют специальные тесты:

  • нетрепонемные (микрореакцию преципитации (RPR — антикардиолипиновый тест), реакцию Вассермана, микроскопический тест VDRL, сифилис АгКЛ и другие),
  • трепонемные (ИФА, РИФ, РПГА, реакцию иммобилизации трепонем, иммуноблотинг и т.д).

Наиболее «классическим» тестом считается реакция Вассермана.

Суть RW заключается в том, что кровь больного сифилисом, при добавлении в нее специального белка-агрессора, способна образовывать с ним комплексы, абсорбирующие комплемент, которые будут выпадать в осадок.

То есть, к сыворотке крови пациента присоединяют искусственный аналог трепонемы (кардиолипиновый антиген) и специальный связывающий белок (комплимент). Если в крови присутствуют антитела (специфические белки защитники) к бледной трепонеме, то происходит связывание кардиолипинового антигена и этих антител при участии комплемента. Полученное соединение выпадает в осадок, оцениваемый как ++++.

В норме, в сыворотке здоровых людей происходит гемолиз эритроцитов. То есть, в крови нет антител, с которыми могут реагировать кардиолипиновый антиген, а, следовательно, в сыворотке не происходит реакции адсорбирования и связывания комплемента. Свободный комплемент участвует в гемолизе, появление которого оценивается как отрицательная реакция Вассермана, то есть “-“.

Анализ крови на реакцию Вассермана имеет пять вариантов ответа:

  • — (свидетельствует о том, что в сыворотке произошел полный гемолиз эритроцитов, а значит, анализ на сифилис отрицателен);
  • + (такой ответ трактуется как сомнительный, одним + оценивают слабовыраженную задержку гемолиза);
  • ++ (наблюдается при частичной задержке гемолиза и расценивается как слабоположительная реакция Вассермана);
  • +++ (такой результат расценивается как положительная RW, свидетельствующая о значительной задержке гемолиза);
  • ++++ (резко положительная RW, полное отсутствие гемолиза и выпадение осадка говорит о наличии у пациента сифилиса или других заболеваний, ставших причиной получения ложноположительной RW).

Первый ответ свидетельствует об отрицательной RW и не требует дальнейших исследований. При получении других результатов, следует учитывать, что реакция Вассермана не является высокоточной и специфичной.

В связи с этим, при получении сомнительных, слабоположительных и резко положительных реакций Вассермана, для уточнения диагноза проводят трепонемные тесты.

Ложноположительные результаты могут быть связаны с употреблением жирной пищи, спиртных напитков, беременностью, менструацией, малярией, системной красной волчанкой и т.д.

В современных лабораториях «классическая» реакция Вассермана считается устаревшей и не используется. Однако в листе ответов и бланке назначений все равно часто пишут RW.

В настоящее время под этим термином подразумевают модифицированные современные RW.

Наиболее распространенный аналог реакции Вассермана — это RРR (неспецифический антифосфолипидный тест). Он также относится к нетрепонемным тестам (то есть не обладает высокой специфичностью), однако более чувствителен и имеет меньший риск ложноположительных результатов, чем классическая реакция Вассермана.

Тест RРR является скрининговым исследованием, позволяющим обнаружить антитела (IgG и IgM) к кардиолипину.

Для проведения анализа, также, как и для классической реакции Вассермана, применяется венозная кровь.

Анализ желательно сдавать натощак. За час до взятия крови исключается курение. Несмотря на то, что риск ложноположительных результатов при RРR ниже, чем при RW, в идеале, предпочтительно не употреблять накануне анализа спиртные напитки и жирную пищу.

Также, может использоваться специфический трепонемный тест (РПГА или ИФА IgG/IgМ на сифилис). Этот тест обнаруживает в крови специфические антитела исключительно к бледной трепонеме, поэтому может применяться для уточнения результатов после проведения нетрепонемных тестов. Его стоимость составляет от 320 до 380 рублей.

Положительная RPR может выявляться уже через семь – десять суток после появления у пациента первичного сифилитического шанкра или через три-пять недель после заражения.

Реакция Вассермана обладает чувствительностью от 70 до 80% при диагностике первичного сифилиса и практически стопроцентной чувствительностью при раннем латентном и вторичном сифилисе.

После наступления вторичной стадии, титры начинаю снижаться. Следует учитывать, что около тридцати процентов позднего сифилиса может быть ложноотрицательным по RPR.

Поэтому проведение трепонемных тестов, с целью уточнения диагноза, является обязательным.

Однако, реакция Вассермана (RPR) может эффективно применяться для контроля проводимого лечения сифилиса.

Основными показаниями к проведению анализа служат:

  • случайные половые связи;
  • употребление наркотиков;
  • контакт с больным сифилисом;
  • подозрение на сифилис (наиболее специфично появление твердого шанкра);
  • контроль лечения сифилиса;
  • беременность, донорство, работа в медицинских учреждениях (входит в список стандартных обследований);
  • расстройства психики и поражения нервной системы (нейросифилис).

Также, обязательному обследованию подлежат дети, рожденные от инфицированных матерей.

Чаще всего ложноположительная реакция Вассермана выявляется у пациентов с:

  • СД (сахарный диабет);
  • туберкулезом;
  • злокачественными новообразованиями;
  • аутоиммунными патологиями (системное поражение соединительной ткани);
  • вирусными гепатитами;
  • энтеровирусной инфекцией;
  • тяжелой пневмонией;
  • инфекционным мононуклеозом;
  • скарлатиной;
  • малярией;
  • подагрой;
  • алкоголизмом;
  • антифосфолипидным синдромом (при исключенном до этого (при помощи трепонемного теста) сифилисе, RW может применяться с целью подтверждения этого синдрома);
  • эозинофильным инфильтратом в легких.

Также, ложноположительные результаты возможны у детей на седьмой-десятый день жизни, беременных, пациентов после вакцинации и носителей несифилитических трепонем. У лиц, принимающих наркотические средства, реакция Вассермана также будет ложноположительной.

Еще следует учитывать, что при очень высоком титре сифилитических антител могут диагностироваться ложноотрицательные результаты.

В связи с этим, RW следует проводить в комплексе, с использованием специфических трепонемных тестов. Чаще всего применяют ИФА или РПГA к Trepоnemа pаllidum IgG/IgМ,

Положительная RPR наблюдается при сифилисе:

  • первичном (если заражение произошло от одного до трех месяцев назад);
  • вторичном (заражение — более трех месяцев назад);
  • третичном (заражение- более трех лет назад).

Также, положительный ответ может выявляться в течение года после проведенного лечения и при формировании серорезистентности (также после лечения).

При получении отрицательного ответа нельзя исключить раннее серонегативное первичное или позднее третичное заболевание.

По материалам serdcet.ru


Adblock
detector