Ифа и рпга положительны это сифилис


Ни для кого не является секретом, что своевременная диагностика любого заболевания означает едва ли не половину успеха его лечения. Очень важно подобрать именно те анализы, методы или способы диагностики, которые действительно помогут поставить точный диагноз, а не запутают врача еще сильнее. Иммуноферментный анализ крови давно зарекомендовал себя методом, позволяющим не только получить положительный или отрицательный ответ на вопрос – болен ли человек какой-либо половой инфекцией, но и определить, на какой стадии развития находится заболевание, а также понять, была ли подобная проблема у пациента в анамнезе. ИФА на сифилис на сегодняшний день – один из наиболее чувствительных и специфичных анализов, при этом его точность составляет около 90%.

Тест-системы, которые использует метод иммуноферментной диагностики, предназначены для выявления не только сифилиса, но и множества других инфекций: гепатит, ВИЧ, ЦМВ, герпес, токсоплазмоз и т.д. Анализ ИФА на сифилис позволяет определить антитела (IgG, IgA, IgM) к бледной трепонеме, содержащейся в крови больного человека. Этот метод позволяет увидеть взаимодействие антител со специальными препаратами, в которых заложены антигены, способные в комплексе с антителами образовать признак заболевания, хорошо заметный при различных способах диагностики.

В основе иммуноферментного анализа на сифилис лежит метод взаимодействия выявляемых в крови антител с антигеном возбудителя инфекции. Диагностика будет зависеть от того, какие именно антитела использовались: могут выявляться либо антитела определенного класса, либо в общем. Для диагностики этим методом кровь берется натощак из вены.

ИФА анализ крови на сифилис подразумевает использование трех классов иммуноглобулинов: G, M, A. Указанные иммуноглобулины имеют одно важное для диагностики сифилиса методом ИФА свойство: они вырабатываются в строго определенной последовательности, благодаря чему ИФА позволяет определить, на какой именно стадии находится процесс и какова динамика его развития:

  • Иммуноглобулин М в крови показывает, сколько времени прошло с момента заражения. Однако не всегда положительные результаты его наличия означают наличие венерического заболевания: возможно, у человека произошло обострение какой-либо хронической болезни, вызвавшее подобную реакцию.
  • Наличие антител IgA означает, что с момента заражения прошло не менее месяца.
  • Поскольку иммунитет к данному заболеванию не вырабатывается, положительный результат обследования на IgG может показывать как пик заболевания, так и период после пройденной терапии.

    Следует отметить, что ИФА положительный на сифилис – это не повод для паники. Дело в том, что такой метод позволяет определить лишь наличие антител, но не возбудителя. Следовательно, если результат ИФА сифилис – положительно, это еще не является основанием для того, чтобы поставить диагноз. Однако в научном мире тест-системы совершенствуются ежедневно, и на сегодняшний день это означает, что в большинстве случаев результатам анализов все же можно доверять.

    Результатов диагностики бывает всего два: «положительный» и «отрицательный». В первом случае положительные данные означают, что у пациента заболевание в одной из стадий, либо что он совсем недавно окончил курс лечения. Отрицательный же результат иммуноферментного исследования крови означает либо отсутствие заболевания, либо очень раннюю стадию его развития.

    Дерматокосметология как направление медицинской деятельности существует с незапамятных времен, поскольку ее предмет отражает постоянное и естественное стремление человека к красоте и здоровью тела.

    В последнее время наблюдается повышение частоты воспалительных заболеваний гениталий герпетической этиологии с преобладанием латентного, хронического рецидивирующего течения с развитием различных нарушений репродуктивного и соматического здоровья.

    Побочное действие лекарственных средств (ПДЛС) продолжает оставаться одной из актуальнейших проблем клинической медицины, в том числе дерматологии, занимая четвертое место после болезней сердца, онкологических заболеваний и инсульта среди причин смерти.

    Выкидыш и замершая беременность для любой женщины, мечтавшей о ребенке, — большое горе. Как не допустить повторения такой ситуации в будущем? Узнайте больше о современных способах выявления и лечения нарушений, предрасполагающих к выкидышу.

    У пациентов, прошедших курс лечения, может сохраняться положительный результат, так называемый «серологический шрам».

    Т.о. врач должен оценить состояние комплексно на очном приеме. Если сифилис был давно, симптомов нет, других клинических проявлений нет, первая беременность благополучна, то повода для таких мероприятий нет!

    У меня следующий вопрос (очень для меня важный!):

    На данный момент беременность 32 недели. В 14 недель сдавала в ЖК обязательные анализы и оказалась реакция на сифилис положительной. Ни я ни муж никогда не болели сифилисом, вместе 10 лет, у меня других партнеров не было, у мужа до меня был 1 контакт с презервативом. Сразу было сделано полное обследование в КВД и меня и мужа. Результат: у мужа все отрицательно, у меня — КСР — отрицат.; РПГА — отриц.; РИП — отриц.; РИФ абс. — отриц; ИФА lgM — отриц.; ИФА lgG — положит. т 1/80. Было рекомендовано повторить анализы в 20 недель. Результаты в 20 недель: КСР — отрицат.; РПГА — отриц.; РИП — отриц.; РИФ абс. — отриц; ИФА lgM — отриц.; ИФА lgG — слабоположит. т 1/40. Получила заключение: «Данных за сифилис нет. Сероколебания носят неспецифический характер». И вот в 32 недели опять обязательные анализы в ЖК, результат — ИФА (АТ кTreponema pallidum сум. — положит. т 1/80), ИФА (Микрореакция) — отрицат. В ЖК опять начали гонять к дерматовенерологам, в КВД, опять нервы и т.д. Неужели снова нужно делать полное обследование? На сколько я знаю за 2-3 недели до родов необходимо делать последний, 3-й, обязательный анализ на сифилис. И там скорее всего тоже будет положит. реакция. Очень переживаю! Заранее благодарна за ответ!

    P.S. Прошу прощения если аббревиатура некоторых реакций неправильно написана (уж очень неразборчиво в заключении врач написал)

    Здравствуйте. Я вам уже задавала вопрос на сайте «Здоровье Украины» очень кратко. Я полно напишу свою историю. Пожалуйста, проконсультируйте. Какие анализы нужно ещё сдать?

    2 года назад был случайный половой контакт открытый.

    Через 1,5 месяца начался какой то ужас: длительная лихорадка, в области щитовидки как будто шла какая то работа, что то гудело, потом головные боли, ангины, сильные боли в костях и мышцах сначала колющего характера, потом как кипяток шёл по мышцам,тошнота,Сыпь разовая,частые ОРВИ,которые длительное время не поддавались лечению,отдышка,трудности при дыхании,неприятный запах изи рта, невралгии, ночное потоотделение,сильная слабость, снижение работоспособности. Я превратилась почти в труп. До этого я была здоровой и цветущей девушкой, профессионально занималась танцами.Физически была достаточно вынослива и активна. Простудами вообще практически не болела.Была практически здорова.

    Через 1год и 10 месяцев после незащищённого полового контакта сдала тест на вич в 2 разных лабораториях ИФА на антитела к вич отрицательно.

    Гепатит В и С отрицательно.

    Вирус герпеса 6 типа отрицательно

    Токсоплазмоз ПЦР отрицателно

    иммуноглобулин А 3,78 г/л (норма 0.70-4.00)

    иммуноглобулин М 4,04 г/л (норма 0.40-2.30)

    иммуноглобулин G 12,74г/л (норма 7.00-16.00)

    Иммуноглобулин Е 8,49 г/л (норма до 100)

    компонент комплемента С3 1,54 г/л (норма 0.9-1.8)

    компонент комплемента С4 0,43 г/л (норма 0,1-0,4)

    -спонтанная 112 оптич.единицы 80.0-125.0

    -индуцированная 212 оптич.единицы 150.0-380.0

    — фагоцитарный индекс 1,9 (1.5-3.0)

    митогеном Кон.А 1,36 оптич.единицы (1.2-1.68)

    ЦИК крупные 18 оптич.единицы (до 20)

    ЦИК средние 99 оптич.единицы (60.0-90.0)

    ЦИК мелкие 182 оптич.единицы (130.0-160.0)

    Т-лимфоциты (СД3+,СД19-) 84,7 %проценты (норма 54-83)

    Т-хелперы/Т-индукторы (СД4+,СД8-) 66.1% (норма 26-58)

    (СД4+,СД8-/СД4-,СД8+) 3.8 % (норма 1.2-2.3)

    NK клетки (СД3-, СД56+) 5,3 % (норма 5-15)

    В-лимфоциты (СД3-,СД19+) 9,5% (норма 5-14)

    Моноциты (СД14) 1,4% (норма6-13)

    Общий лейкоцитарный антиген,СД45 99,8 % (норма 95-100

    Биохимия положительное СРБ, остальное норма.

    Цитирую: «Может, нужно сдать ещё какие то анализы и прийти к вам на приём?» Целесообразно изменить порядок действий: сначала прийти на прием, а потом, выслушав и осмотрев Вас, ознакомившись со всеми имеющимися результатами исследований, разработать программу обследования.

    Мне 31 год,я на 35 неделе беремености. 2 месяца назад сдала кровь на инфекции методом ИФА(потому как попала с отрвлением в инфекционное отделение, там и сделали исследование),мой гинеколог не направляла меня сдавать кровь на инфекции на ранних строках беременности (что мне кажется странным, хотя на СПИД и сифилис кровь брали трижды за беременность, все торицательно). Сейчас мне сообщили результаты. Прошу, прокомментируйте, пожалуйста. Некоторые показатели вызывают тревогу, такие как на вирус крснухи, ЦМВ, герпес HSV 1/2, Эпштейн-Барр вирусная инфекция (EBV):

    Герпес HSV Ig G 1 типа К=3,4, 2 типа отр.

    хламидии и микоплазма — отр.

    Коэффициент позитивости К=оптическая плотность образца. Если К меньше 0,9 — результат отрицательный, если К от 0,9 до 1,1 — сомнительный, если К больше 1,1 — положительный.

    Ig G, EBV, NA значение до 55 у.е./мл может быть в норме, выше этого значения — результат положительный.

    Пожалуйста, прокомментируйте! Благодарю за внимание!

    Выявление антител IgG к ВПГ1 и ЦМВ лишь свидетельство того что Вы, как и большинство взрослых, пожизненный носитель ВПГ1 и ЦМВ. Само по себе носительство этих вирусов не опасно, вреда не причиняет, лечения не требует. Лечение может потребоваться лишь в случае их активации. С микоплазмами и хламидиями Вы ранее не встречались.

    С вирусом краснухи Вы уже знакомы. Если Вы не знаете болели ли Вы когда то краснухой или были вакцинированы, то чтобы убедиться что иммунитет к ней полностью сформирован, лучше проверить авидность IgG к краснухе (должна быть высокой). Тогда у Вас сформирован стойкий пожизненный иммунитет к вирусу краснухи. С иммунитетом Вы сама больше не сможете болеть краснухой, а все Ваши будущие детки будут защищены от них всю беременность и 6-12 месяцев после родов (пока в их крови будут циркулировать Ваши антитела IgG к вирусу краснухи)

    С ВЄБ нужно разбираться на очном прийме, т.к. неясно идет речь о антителах IgG к VCA или IgМ.

    Такая ситуация, как у вас, встречается часто. Для того чтобы понять, есть ли необходимость в повторном лечении заболевания, давайте разберемся, какой именно анализ вы сдавали и какие варианты развития ситуации имеются на данный момент.

    Трепонемные тесты у человека, перенесшего сифилиса, будут положительными всю жизнь. Антитела к инфекции сохраняются в крови на долгие годы. Это так называемая напряженность иммунитета. При исследовании крови ИФА при пролеченном сифилисе положительными будут титры IgG, а IgM будут отрицательными. При таких результатах анализов повторное лечение не требуется.

    Чтобы диагностировать у человека сифилис, одного анализа мало. Как правило, обследование включает три теста: один неспецифический и два специфических. Как правило, назначают следующие серологические анализы: МР, РИФ и РПГА. По результатам этих тестов судят о том, болен ли человек и как давно произошло заражение. Рассмотрим возможные комбинации:

  • МР+, РИФ-, РПГА- заражение сифилисом отсутствует. МР дал ложноположительный результат.
  • МР+, РИФ+, РПГА- первичное заражение сифилисом, но, возможно, МР и РИФ показали ложноположительные результаты. Требуется пересдача анализа.
  • МР+, РИФ+, РПГА+ сифилис подтвержден. Возможно, курс лечения был пройден недавно.
  • МР-, РИФ+, РПГА- сифилис на ранней стадии или РИФ дал ложноположительный результат.
  • МР-, РИФ-, РПГА+ давняя инфекция, сифилис излечен. Возможно результат РПГА — ложноположительный.
  • МР-, РИФ+, РПГА+ давняя инфекция, сифилис излечен. Возможен поздний сифилис.
  • МР-, РИФ-, РПГА- сифилис не подтвержден или ранняя стадия развития заболевания до появления антител.

    В вашей ситуации необходимо исключить серорезистентный сифилис — форму заболевания, при которой даже после прохождения полного курса антибиотиков тесты показывают положительный результат. Это говорит о том, что лечение не помогло и в организме живет измененная форма спирохеты, стимулирующая выработку антител, или лечение помогло, но из-за нарушений в работе иммунной системы антитела против возбудителя сифилиса все еще вырабатываются.

    Если диагноз «серорезистентный сифилис» подтвержден, то первым делом необходимо выяснить, есть ли следы бледной трепонемы в организме. Это можно сделать с помощью дополнительных тестов (ПЦР или ИФА). При обнаружении таких следов будет назначен дополнительный курс лечения антибиотиками. В случае если серорезистентность вызвана нарушенной работой иммунной системы, лечение не требуется, т.к. это означает, что сифилис на самом деле излечен.

    Отдельный вопрос — нейросифилис. Это редкое состояние, когда лечение вторичного и скрытого сифилиса препаратами пенициллина, которые не проходят через гематоэнцефалический барьер, не позволило полностью победить инфекцию. Чтобы исключить наличие нейросифилиса, проводится пункция костного мозга.

    Неспецифические (нетрепонемные) тесты показывают наличие антител к сифилису в крови. Титр от 1:2 до 1:320 говорит о том, что вы заражены сифилисом. На поздней стадии заболевания титр может быть низким. Ложноположительные результаты встречаются в 2 — 5% случаев при системных заболеваниях соединительной ткани, инфекционных заболеваниях, болезнях сердца, сахарном диабете, беременности, регулярном потреблении алкоголя и наркотиков, недавно проведенной вакцинации. Также в 10% случаев у людей, успешно излечившихся от сифилиса, результат МР может быть положительным на протяжении всей жизни.

    № 44 821 Венеролог 16.06.2017

    Добрый день уважаемые! Мне 35 лет 10 назад заразился сифилисом, прошел лечение стационарно (кололи уколы месяц). У меня здоровая семья и ребенок, но анализы до сих пор «положительные». При каждом удобном случае врачи говорят что у меня РВ. Приходиться объяснять что это было давно. Всё это очень не приятно. Так вот вопрос, можно ли убрать с крови сифилис, т. Е. Чтоб при сдачи анализов они были отрицательные?

    Здравствуйте, спасибо за вопрос. Антитела о перенесенном сифилисе остаются в крови . ВЫ ТО ОБ ЭТОМ ЗНАЕТЕ, ЧТО ЛЕЧИЛИСЬ.

    УТОЧНЯЮЩИЙ ВОПРОС 17.06.2017 Андрей, Москва

    Спасибо за ответ. Т. Е. При сдачи анализов, даже через 20 лет, фактор будет положительный? Можно как то сделать чть анализы были отри

    Здравствуйте, спасибо за вопрос. Повлиять на наличие антител в крови , на их выработку, на иммунитет не можем.

    УТОЧНЯЮЩИЙ ВОПРОС 19.06.2017 Андрей, Москва

    Вы не отвечаете на вопрос. Фактор положительный на сегда остаётся в крови или нет?

    Здравствуйте, да , всякий раз будут в наличие антитела , которые свидетельствуют о перенесенном заболевание .

    Добрый день! У меня такая ситуация: В 2005 г. Был выявлен ранний скрытый сифилис. Все анализы резко положительные. РВ 4+ да еще и с титрами высокими. Лечение прокаин пенец. 20 уколов. Титры падали, но все еще было 4+. Через 1.5 года доп. Лечение цефтриаксон 14 уколов. Сразу пошел сдвиг 2+. Так и на этом остановилось МР 2+, IG 12 КП. Потом беременность уже 3+, IG G КП 9.5. Проф лечение не назначили. Родила в 2009 г. Ребенку взяли кровь из пальца на сумм антитела методом ИФа экспресс в 3 и 6 мес. .

    Здравствуйте. Сдали анализы на наличие паразитов (у ребенка родственницы обнаружились глисты). Сдавали кал. В итоге то что у ребенка родственницы у нас не обнаружили, но, у меня (муж), жены (беременная), детей (4 и 5 лет) обнаружили токсокару. Вопрос, могут ли определить наличие токсокары по калу? (просто есть мнение одного из врачей, что по калу обнаружить токсокару нельзя, хотя Вы же знаете, врачи разные бывают). В листе анализов написано просто: Аскарида — не обнаружено

    Здравствуйте! В 2011 году узнала, что у меня сифилис, прошла курс лечения, Через время родила ребёнка, ребёнок здоров. В прошлом году забеременела во-второй раз, На 20 неделе прошла ещё проф- лечении, были анализы при поступлении. Рпга3+, рмп2+. Выписалась С РПГА2+, РМП отр. После рождения у ребёнка показало РПГА2+. ИФА полож. ВРАЧИ ТОЛКОМ НИЧЕГО НЕ ГОВОРЯТ, БОЛЕН РЕБЁНОК ИЛИ НЕТ. И вот нам будет 11 месяцев, будем снова ехать сдавать анализы, ребёнку, Разводят руками почему, до сих пор не почист.

    У жены во время беременности 3-ий анализ крови был один плюс на сифилис, сдали в частной клинике-отрицательный. Но врач отправила в КВД там ее анализ-сомнительный мой-отрицательный. Во время родов взяли пуповинную кровь, ответ ИФА положительный а экспресс реакция-отрицательный. Ребенку даже прививки не делают опять в КВД гоняют. Что делать? Это сифилис?

    Здравствуйте! У меня критическая ситуация. Более 10 лет назад был выявлен сифилис. 4+. Прошла лечение пенициллином 3 укола. Повторные анализы показали лучший результат. Каждые 3 месяца сдавала кровь на КСР, но кресты то увеличивались, то уменьшались (но не исчезали). Сдавала anti-Trpanema LgM-отр, anti-Trpanema pallidum суммарный LgM+LgG — полож, КП 12.89; 1: 640. ЭДС РМП отр. Периодически проходила доп. Лечение (цефтриаксон). В 2012 году забеременела, прошла проф. Лечение для себя и для ребенка.

    18+ Онлайн-консультации носят информационный характер и не заменяют очной консультации врача. Пользовательское соглашение

    Ваши персональные даннные надежно защищены. Платежи и работа сайта осуществляются c использованием защищенного протокола SSL.

    Опытным врачам известно, что положительный анализ на сифилис свидетельствует об инфицировании человека и является показанием к проведению специфической антибактериальной терапии. Данное заболевание легко передается контактным и другими механизмами и нередко приводит к поражению внутренних органов.

    Кровь на сифилис берется при подозрении на заболевание. Показаниями к проведению анализов являются:

    • первичное обследование пациента;
    • выявление скрытой формы заболевания;
    • обследование доноров;
    • проведение хирургических вмешательств;
    • скрининговое обследование населения.

    Основными задачами лабораторной диагностики являются выявление генома возбудителя сифилиса (бледных трепонем) и антител к ним. Положительными могут быть следующие анализы:

  • микроскопия в темном поле;
  • полимеразная цепная реакция;
  • реакция быстрых плазменных реагинов;
  • реакция Вассермана;
  • реакция иммунофлуоресценции;
  • реакция пассивной гемагглютинации;
  • RW с антигеном трепонем;
  • реакция иммобилизации бледных трепонем.

    Лабораторная диагностика имеет решающее значение в постановке правильного диагноза.

    В выявлении возбудителя данного заболевания широко применяются микроскопические методы. К ним относятся темнопольная микроскопия, исследование по Романовскому-Гимзе и импрегнация трепонем серебром. Материалом для исследования являются:

  • содержимое шанкра, эрозий и язвочек;
  • пунктат лимфатических узлов;
  • мазок с пораженных слизистых.

    При сифилисе положительна темнопольная микроскопия. При направлении света на предметное стекло с препаратом больного бледные трепонемы начинают светиться на полностью темном фоне. Они имеют тонкую, спиралевидную форму и способны к различным типам движений (поступательным, вращательным, сгибательным). Трепонемы имеют несколько завитков.

    При сифилитической инфекции очень информативен анализ по методу Романовского-Гимзе. Препарат окрашивается специальными веществами, высушивается и исследуется под микроскопом. Для этого применяется масляная среда. Положительным анализ является в том случае, если визуально обнаруживаются микробные клетки. Отличить бледных трепонем от других спирохет позволяет розовый цвет. Реже в диагностике сифилиса применяется метод импрегнации серебром, при котором возбудитель окрашивается в темно-коричневый или черный цвет.

    Для установления заболевания применяется реакция Вассермана. В настоящее время она проводится редко. В современных лабораториях анализ RW заменен антикардиолипиновым тестом. Реакция Вассермана — это экспресс-метод диагностики сифилиса. Недостатком анализа является низкая информативность. Часто наблюдается ложноположительный результат.

    При первичной форме сифилиса RW становится положительной только через 6–8 недель после заражения. Для исследования берется кровь из вены. Суть реакции в том, что в ответ на добавление к крови пациента специального белка образуется комплекс и наблюдается выпадение осадка. Происходит это, если в материале присутствует кардиолипин бледных трепонем.

    По результатам анализа ставятся кресты. Ложный результат часто наблюдается, если у человека имеются другие заболевания (красная волчанка, туберкулез). На результат могут повлиять:

  • менструации;
  • прием алкоголя;
  • курение;
  • наличие опухолей;
  • прием лекарств;
  • употребление жирной пищи.

    Результат в виде 1 креста расценивается как сомнительный. При этом реакция гемолиза выражена слабо. 2 креста ставятся при частичной задержке разрушения эритроцитов пациента. Это указывает на слабоположительный анализ. 3 креста свидетельствуют о выраженной задержке гемолиза. Реакция Вассермана считается положительной. Возможен ответ в виде 4 крестов. Он указывает на наличие заболевания.

    При обследовании больших групп людей на сифилис RPR-тест является одним из самых информативных. Он более точен, нежели реакция Вассермана. Данное исследование относится к нетрепонемным методам, то есть оно направлено на поиск антител (иммуноглобулинов) против липидов клеток микробов или фосфолипидов разрушенных тканей.

    При проведении RPR-теста ложноположительный результат наблюдается в 1–2% случаев. Антитела в крови больных обнаруживаются уже через 7–10 дней после возникновения твердого шанкра. Со временем титр антител снижается и к 3 периоду заболевания возможен ложноотрицательный результат. Даже если поставлены при сифилисе 4 креста, дополнительно проводятся трепонемные тесты (РИФ, ИФА, РПГА, иммуноблот и РИБТ).

    После проведения неспецифических анализов проводится серодиагностика. Очень информативны реакция иммунофлуоресценции и иммуноферментный анализ. Эти реакции становятся положительными в последние дни бессимптомного (инкубационного) периода. Они информативны при диагностике скрытого сифилиса и выявления ложноположительных реакций.

    У переболевших людей в крови всю жизнь выявляются специфические антитела. РИФ, РПГА и ИФА не применяются для определения эффективности антибактериальной терапии. Расшифровка анализа крови на сифилис проста. Результат часто представляется в виде крестов или процентов. Знак «-» указывает на то, что человек не инфицирован бледными трепонемами. 2 креста свидетельствуют о сомнительном результате. Слабоположительный анализ приравнивается к 3 крестам. 4 крестика указывают на наличие в организме бледных трепонем.

    Нужно знать причины положительных лабораторных исследований, проводимых при подозрении на сифилис. Обнаружение трепонем или антител свидетельствует о заражении. Основные причины возникновения и развития заболевания:

    • незащищенные половые контакты;
    • занятие коммерческим сексом;
    • пренебрежение барьерным методом контрацепции;
    • внутриутробное инфицирование;
    • совместное введение наркотических средств через 1 шприц;
    • несоблюдение правил антисептики;
    • случайное попадание крови больных на кожу или слизистые;
    • пользование чужой посудой, бельем или мочалками;
    • переливание компонентов крови без предварительной проверки донора;
    • асоциальный образ жизни.

    Причиной положительных результатов на сифилис могут быть неправильная подготовка пациента, наличие сопутствующей патологии и ошибки во время самого анализа.

    При обнаружении в организме пациента бледных трепонем или иммуноглобулинов требуется лечение. Дополнительно могут проводиться следующие исследования:

  • общий и биохимический анализы крови;
  • анализ мочи;
  • МРТ или КТ;
  • рентгенография;
  • УЗИ;
  • осмотр слизистых и кожных покровов;
  • исследование спинномозговой жидкости.

    При положительном результате анализа на сифилис врач должен определить сроки заражения и период (стадию) заболевания. После этого подбирается схема терапии.

    Если выявлены бледные трепонемы, то назначаются системные антибиотики (пенициллины, макролиды, тетрациклины). Наиболее эффективны Доксал, Диксициклин-Акос, Бициллин-3, Бициллин-5, Бензилпенициллина натриевая соль, Цефтриаксон и Азитромицин Форте.

    На поздних стадиях наряду с антибиотиками показаны препараты висмута и йода, иммуностимуляторы и физиопроцедуры. По окончании курса терапии организуются контрольные анализы. Таким образом, при подозрении на сифилис проводятся трепонемные и нетрепонемные тесты. Помимо самого пациента, обследоваться должны его половые партнеры.

    Анализ на сифилис — один из самых частых анализов, который человеку приходиться сдавать в течение всей жизни. Все скрининги (массовые обследования населения), медосмотры, госпитализации — всё сопровождается исследованием крови на сифилис.

    Вовсе не удивительно, что многие люди сталкиваются с положительными результатами анализов, совсем того не ожидая. У большинства в такой ситуации поднимается паника, возникает вопрос: «А бывает ли ошибочным анализ на сифилис?». Ответ: бывает!

    Не стоит беспокоиться заранее — сифилис может быть ложным. Чтобы это проверить, нужно просто сдать дополнительные анализы.

    Однако даже если положительный анализ на сифилис в итоге не подтвердился, сама ситуация все равно остается неприятной для человека. Возникают опасения: вдруг, все же, что-то да есть…

    Чтобы развеять сомнения, подробно расскажем: как, когда и при каких условиях тест на сифилис может быть положительным.

    Анализы могут показать ложный сифилис при разных состояниях человека: острые и хронические болезни, травмы, недавно поставленные прививки и т.д.

    Все эти состояния объединяет то, что при них в крови образуются неспецифичные (созданные для борьбы с разными угрозами) белки — иммуноглобулины, они же — антитела.

    Реакция Вассермана (RW) и другие анализы на сифилис реагируют на эти белки, принимая их за сифилитические, так как они похожи. Хотя в действительности организм мог создать неспецифичные белки для защиты от совсем другого возбудителя. В результате эти «безобидные» иммуноглобулины становятся причиной ложноположительных результатов на сифилис.

    По разным причинам анализы на сифилис могут ошибочно стать положительными. Это состояние может быть кратковременным или сохраняться в течении нескольких лет. Ложные результаты можно условно поделить на «острые» и «хронические».

    «Острые» ложные результаты появляются из-за острой болезни или травмы и сохраняются в течение 6 месяцев. Причиной их появления могут быть:

  • Острые инфекционные заболевания (как правило, с высокой температурой);
  • травма;
  • инфаркт миокарда;
  • вакцинация;
  • отравление.

    «Хронические» ложные результаты появляются на фоне хронических состояний и могут повторяться более 6 месяцев. К таким состояниям относятся:

  • Заболевания соединительной ткани;
  • туберкулез, лепра и другие хронические бактериальные инфекции;
  • хронические вирусные инфекции: ВИЧ, гепатиты В, С, D и т.д.;
  • заболевания печени;
  • аутоиммунные заболевания;
  • возрастные изменения организма.

    Хотя тесты на сифилис обладают довольно высокой точностью, иногда они все равно могут ошибаться. Цель большинства анализов на сифилис — проверить, есть ли в крови человека антитела, которые его организм выработал для защиты от бледной трепонемы. Для такой проверки исследователи берут либо настоящий возбудитель сифилиса (бледную трепонему), либо ее искусственные аналоги.

    Точность анализов зависит от многих технических условий, но одно из самых важных — это материал, который используют для проверки. Если для анализа берут искусственные аналоги бледной трепонемы (эти анализы так и называются: нетрепонемные), результат будет менее точным. Если использовали реальную трепонему (трепонемные тесты) — анализ окажется значительно точнее.

    Выходит, что среди всех тестов на сифилис чаще всего ошибаются нетрепонемные тесты: они больше остальных дают ложноположительный результат. Поскольку они являются самыми дешевыми, их применяют для массового обследования населения. А вот тех, у кого результат нетрепонемного теста оказывается положительным, обследуют уже с помощью более дорогих и точных трепонемных тестов.

    К нетрепонемным тестам для массового обследования относятся: РМП, VDRL, USR, RPR и TRUST. Наиболее точные из этих тестов — RPR и TRUST. Вероятность их ошибки в положительную сторону составляет 1–2%. Чуть менее точные — РМП и VDRL. Вероятность их ошибки — 2–3%. Наименее точным является USR — его погрешность составляет 7%.

    Среди трепонемных тестов (РИФ, РПГА, ИФА, иммуноблоттинг) вероятность ошибки составляет менее 1%.

    Самые точные положительные результаты дают прямые методы исследования (особый подвид высокоточных анализов): темнопольная микроскопия (погрешность 0–2%) и ПЦР (погрешность 0–1%). Однако эти методы часто дают ложноотрицательный результат — то есть говорят, что болезни нет, когда на самом деле она есть. Это не позволяет использовать их в качестве основных тестов.

    Для наиболее достоверных результатов вначале проводят один нетрепонемный тест, а потом — в случае положительного результата — один трепонемный.

    Когда в результатах анализов на сифилис приходит «отрицательно» или «положительно», смысл однозначен и понятен. Но вот когда на бланке стоят 1–2 креста или написано «сомнительный результат», встает вопрос: «Что это такое, и может ли это означать ошибку теста?».

    Совсем необязательно: сомнительный результат означает всего лишь небольшое количество антител в крови. Например, это может быть признаком раннего сифилиса (инкубационный период и первые недели твердого шанкра), когда антитела только появляются, или признаком позднего сифилиса (спустя 2–4 года), когда антитела (IgM) постепенно пропадают.

    В этой ситуации, как и с резко положительным тестом, проводят дополнительный подтверждающий трепонемный тест.

    Отрицательный результат дополнительного трепонемного теста может означать одно из двух:

  • Первый тест ошибся, и никакого сифилиса нет.
  • Антитела еще не успели выработаться, и сифилис находится в инкубационном/первичном периоде.

    В любом случае, при сомнительных результатах скринингового теста рекомендуется повторить его через две недели.

    Положительный результат трепонемного теста говорит о том, что сифилис точно есть, и пациент нуждается в лечении.

    Когда сифилис подтвердился, не стоит паниковать. Смело обращайтесь в местный кожвендиспансер. Ни начальству, ни коллегам по работе, ни родственникам о вашей болезни не расскажут. Однако человек должен осознавать, что сифилис — заболевание инфекционное и высокозаразное, поэтому его окружение, особенно семья, подвергается серьезной опасности.

    Если диагноз «сифилис» подтвердился, очень важно внимательно отнестись к следующим рекомендациям:

  • Дерматовенерологу следует показать своего партнера и всех членов семьи, так как, возможно, заражение уже произошло половым и бытовым путем.
  • Если у партнера и детей сифилис не обнаружен, они все равно должны получить превентивное лечение — небольшие дозы пенициллина, чтобы предотвратить развитие болезни, если заражение уже произошло. Подробнее о профилактике сифилиса читайте в отдельной статье.
  • Если человек работает, ему оформляют больничный на время лечения, — при этом на работе о болезни никого не оповещают. Во всех выписках и любой другой медицинской документации болезнь шифруется, а доступ к этой информации есть только у врачей. Медицинскую книжку, если она есть, выдают (или продлевают) сразу после проведенного лечения.
  • Пролеченный сифилис не опасен и не может быть причиной увольнения с работы или отказа в трудоустройстве.
  • Если заразился подросток, он/она также может обращаться в КВД, не опасаясь, что о болезни расскажут родителям. Ему/ей заведут отдельную карту, а обследование и лечение в КВД по месту жительства будут бесплатными.
  • После успешной терапии человеку должны выдать документ, подтверждающий пройденное лечение. Документ нужно обязательно сохранить и брать с собой на все медосмотры. Это избавит от лишних вопросов и внимания со стороны врачей, так как анализы после проведенного лечения могут еще долго оставаться положительными.

    Бывает ли ложный сифилис у беременных? Конечно, бывает. На практике это нередкая ситуация.

    Женщины сдают кровь на сифилис несколько раз за время беременности: в первые 12 недель, за несколько недель до родов (30–35 неделя) и непосредственно перед родами (38–40 неделя) — это необходимый минимум анализов.

    Совсем неудивительно, что при положительном RW-анализе во время беременности у женщин сразу возникает вопрос: «Откуда сифилис?». Но переживать в этой ситуации не стоит: если за последние полгода-год у вас не менялся партнер, и вы уверены в своем и его здоровье, то анализ, скорее всего, является ошибочным.

    Беременность — это полная перестройка организма, как на гормональном уровне, так и на уровне иммунитета. Организм мамы с первых дней старается защитить ребенка от любой угрозы и потому вырабатывает множество различных антител.

    На эти антитела и реагируют почти все нетрепонемные анализы на сифилис.

    Поэтому если нетрепонемный анализ на сифилис (RW или РМП/МР/RPR) показал, что болезнь у женщины есть, то будущей маме дополнительно назначают трепонемные тесты ИФА или РПГА — эти анализы более достоверны и смогут показать, точно ли болен человек.

    О том, чем грозит болезнь новорожденному малышу, читайте в статье «Врожденный сифилис».

    По материалам radea-linia.ru

    Выявление в сыворотке крови специфических антител к бледной трепонеме (Treponema pallidum), используемое для подтверждения результатов неспецифических тестов на сифилис, скрининга сифилиса, обследования контактных лиц и доноров крови.

    Синонимы русские

    Синонимы английские

    Syphilis, passive hemagglutination test; Syphilis, indirect hemagglutination test; Treponema Pallidum Hemaglutination Assay, TPHA.

    Метод исследования

    Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА).

    Какой биоматериал можно использовать для исследования?

    Как правильно подготовиться к исследованию?

    Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

    Общая информация об исследовании

    Сифилис – инфекция, передающаяся половым путем, возбудителем которой является спирохета Treponema pallidum subspecies pallidum. Попадание этой бактерии в организм приводит к развитию иммунного ответа, сопровождающегося выработкой как неспецифических («нетрепонемных»), так и специфических («трепонемных») антител. Выявление антител к T. pallidumсоставляет основу лабораторного подтверждения сифилиса. В зависимости от типа антител, определяемых в реакции, серологические исследования разделяют на неспецифичексие («нетрепонемные») и специфичексие («трепонемные»). Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) относится к «трепонемным», то есть специфическим в отношении T. pallidum тестам.

    РПГА основана на феномене агглютинации эритроцитов, на поверхности которых адсорбированы антигены T. pallidum (реагент РПГА), при добавлении к ним сыворотки больного сифилисом, содержащей специфические антитела к спирохете. Такие антитела появляются в крови пациентов с сифилисом через 2 (IgM) и 4 (IgG) недели после инфицирования. Следует отметить, что этот период может удлиняться до 6 недель. Поэтому чувствительность РПГА в первичном периоде сифилиса несколько уступает чувствительности этого метода во вторичном и третичном периодах и составляет около 86 %. Преимуществом РПГА является высокая специфичность (96-100 %), позволяющая использовать этот анализ в качестве подтверждающего теста после положительного результата какого-либо неспецифического, «нетрепонемного» исследования (например, антикардиолипинового теста, RPR). Чувствительность РПГА во вторичном, третичном периоде сифилиса, а также при скрытом сифилисе составляет 99-100 %.

    Чувствительность РПГА и других «трепонемных» тестов превосходит чувствительность неспецифических («нетрепонемных») тестов, таких как микрореакция преципитации (МРП) с кардиолипиновым антигеном. Поэтому в последнее время в качестве скринингового теста на сифилис стали чаще применять «трепонемные» тесты, в том числе РПГА. При положительном результате скринингового исследования на сифилис с помощью РПГА следует провести подтверждающий тест. В этом случае им является любой другой «трепонемный» тест, но не РПГА (например, иммуноферментный анализ).

    Как правило, результат РПГА остается положительным даже после лечения сифилиса. Исключение составляет ситуация, когда терапия была проведена в самом начале заболевания. Так как результат сохраняется положительным пожизненно, РПГА не предназначена для дифференциальной диагностики раннего и позднего сифилиса. По этой же причине данное исследование не используют, чтобы оценивать эффективность лечения заболевания.

    При добавлении сыворотки больных сифилисом к реагенту РПГА происходит агглютинация (склеивание) и выпадение в осадок эритроцитов. Степень агглютинации зависит от концентрации антител в сыворотке, поэтому РПГА позволяет не только выявить присутствие антител, но и определить их количество. Результат анализа представлен в виде титра антител. Любой положительный титр указывает на возможную инфекцию T. pallidum, однако возможны ложноположительные реакции. Значительно повышенные показатели характерны для вторичного и скрытого раннего сифилиса.

    Ложноположительные результаты РПГА наблюдаются в 0,05-2,5 % случаев и чаще всего обусловлены наличием в сыворотке пациента аутоантител (при системных заболеваниях соединительной ткани, например при системной красной волчанке), антител к другим возбудителям, схожим по антигенной структуре с T. pallidum (Borrelia burgdorferi, сапрофитные трепонемы полости рта и гениталий), а также другими физиологическими и патологическими состояниями (беременность, онкологические заболевания, острый инфаркт миокарда). Как правило, титр ложноположительной реакции РПГА низкий. Исключение составляют результаты РПГА у пациентов с диффузными заболеваниями соединительной ткани и злокачественными новообразованиями, когда титр антител может достигать очень высоких значений. Ложноположительные реакции негативируются спонтанно и бесследно в течение 4-6 месяцев (острая ложноположительныя реакция, часто на фоне беременности) или более длительного периода (хроническая ложноположительная реакция).

    Учитывая эти особенности, результат РПГА следует интерпретировать с учетом дополнительных анамнестических и лабораторных данных. При подтверждении диагноза «сифилис» необходимо исключить наличие других инфекций, передающихся половым путем, а также обследовать всех половых партнеров и членов семьи пациента.

    Для чего используется исследование?

    • Чтобы подтвердить диагноз «сифилис» при положительном результате неспецифического скринингового теста;
    • для скрининга сифилиса;
    • для обследования лиц, находившихся в половом и тесном бытовом контакте с больным сифилисом;
    • для исключения сифилиса у донора крови.

    Когда назначается исследование?

    • пациента с клиническими признаками сифилиса (безболезненный эрозивный или язвенный дефект на твердом основании) и регионарной лимфаденопатии (первичный сифилис), полиморфная кожная сыпь, многоочаговая или диффузная алопеция, сифилитическая лейкодерма (вторичный сифилис), плотноэластический узел с распадом или формированием «сухого» рубца (третичный сифилис);
    • лиц, находившихся в половом и тесном бытовом контакте с больным сифилисом;
    • донора крови;
    • при ежегодном профилактическом обследовании, госпитализации в стационар, оформлении санитарной книжки.

    Что означают результаты?

    Референсные значения: отрицательно.

    Причины положительного результата:

    • первичный, вторичный, третичный, а также скрытый сифилис (приобретенный и врожденный);
    • беременность;
    • ВИЧ-инфекция;
    • гепатиты В и С;
    • употребление инъекционных наркотиков;
    • острый инфаркт миокарда;
    • диффузные заболевания соединительной ткани;
    • возвратный тиф;
    • лептоспироз;
    • клещевой боррелиоз;
    • тропические трепонематозы (фрамбезия, беджель, пинта);
    • воспалительные процессы, обусловленные сапрофитными трепонемами полости рта и гениталий;
    • злокачественные новообразования;
    • обширная травма и переломы;
    • бактериальный эндокардит;
    • туберкулез;
    • инфекционный мононуклеоз;
    • поствакцинальная реакция.

    Причины отрицательного результата:

    • отсутствие сифилиса;
    • первые 2-4 недели после инфекции T. pallidum;
    • неправильное взятие материала на исследование.

    Что может влиять на результат?

    • Результат анализа может быть ложноотрицательным в течение первых 2-4 (до 6) недель после заражения.

    Важные замечания

    • Исследование не позволяет дифференцировать;
      • сифилис (T. pallidum) и другие трепонематозы (T. pallidumsubspeciespertenue, endemicum, carateum);
      • ранний и поздний сифилис.
    • Исследование не предназначено для контроля лечения сифилиса.
    • Результат анализа следует оценивать вместе с дополнительными анамнестическими, лабораторными и инструментальными данными.

    Также рекомендуется

    • Сифилис RPR (антикардиолипиновый тест / микрореакция преципитации), титр
    • Treponema pallidum, IgM, титр
    • Treponema pallidum, IgG, титр
    • Treponema pallidum, IgG вликворе
    • Treponema pallidum, антитела
    • HIV 1, 2 Ag/Ab Combo (определение антител к ВИЧ типов 1 и 2 и антигена p24)
    • Вирусный гепатит B. Контроль активности вируса перед началом лечения
    • Вирусный гепатит C. Анализы для первичного выявления заболевания. Обследование контактных лиц
    • Интимный – оптимальный – анализ мазка у мужчин
    • Интимный – оптимальный – анализ мазка у женщин
    • Госпитализация в хирургический стационар
    • Госпитализация в терапевтический стационар

    Кто назначает исследование?

    Дерматовенеролог, невролог, врач общей практики, эпидемиолог.

    По материалам helix.ru

    Сифилис – заболевание инфекционной природы, обусловленное спирохетой Treponema pallidum, склонное к прогредиентному хроническому течению, с чёткой периодизацией клинической симптоматики.

    Преобладание полового пути передачи над контактным и трансплацентарным ставит это заболевание в ряд венерических (ЗППП, ИППП). Помимо указанных способов передачи инфекции особую роль играет артифициальный путь (от лат. «artificio» — искусственно созданный).

    Он характерен для медицинских учреждений, в основном, реализуется в условиях стационара. Инфицирование происходит при гемотрансфузиях, различных хирургических операциях, инвазивных диагностических методах.

    Несмотря на карантинизацию донорской крови, проблема выявления сифилиса у доноров на разных стадиях заболевания все ещё актуальна.

    Поэтому диагностические мероприятия при сифилисе требуют стандартизации, внедрения новых чувствительных и информативных методов идентификации, а также сведения к минимуму ошибок и неправильной трактовки результатов анализов.

    Диагностика сифилиса имеет некоторые особенности и отличается от диагностики других бактериальных инфекций. Сложное строение и антигенные свойства бледной трепонемы обусловливают ошибки в интерпретации результатов серологических реакций.

    Сдать анализ крови на сифилис предлагают 3 основным группам пациентов:

    1. 1 Скрининг и диспансеризация групп населения (в том числе и беременность, постановка на учет в женской консультации, поступление на работу и оформление медкнижки и так далее).
    2. 2 Скрининг в группах риска (незащищенные половые контакты с человеком, инфицированным сифилисом, лица после принудительных сексуальных контактов, ВИЧ-инфицированные и так далее).
    3. 3 Лица, имеющие симптомы заболевания, или лица с подозрением на сифилитическую инфекцию.

    Все лабораторные методы условно подразделяют на прямые и непрямые.

    1. 1 Идентификация Treponema pallidum в тёмном поле (темнопольная микроскопия).
    2. 2 Заражение подопытных животных (культивирование в лабораторных животных).
    3. 3 ПЦР (полимеразно-цепная реакция).
    4. 4 ДНК-зонд или гибридизация нуклеиновых кислот.

    Серологические реакции — это методы лабораторной диагностики, базирующиеся на обнаружении антител (сокращенно АТ) к антигенам бледной трепонемы (сокращенно АГ). Они имеют основное значение для подтверждения диагноза.

    1. 1 Нетрепонемные тесты:
      • Реакция Вассермана (РСК);
      • Реакция микропреципитации (МР, РМП) и ее аналоги, которые приведены ниже;
      • Тест быстрых плазменных реагинов (RPR, РПР);
      • Тест с красным толуидином и сывороткой (TRUST);
      • Нетрепонемный тест Лаборатории исследования венерических болезней — VDRL.
    2. 2 Трепонемные тесты:
      • Р-ция иммобилизации Treponema pallidum – РИБТ/РИТ;
      • Р-ция иммунофлюоресценции – РИФ, FTA (разведения сывороток РИФ-10, РИФ-200, РИФ-абс);
      • Р-ция пассивной гемагглютинации (РПГА, ТРПГА, TPHA);
      • Иммуноферментный анализ (ИФА, EIA);
      • Иммуноблоттинг.

    Рисунок 1 — Алгоритм серодиагностики сифилиса

    Эти методы сводятся к выявлению особенностей гистоморфологии сифилитических проявлений. Внимание уделяется тонкостям строения твёрдого шанкра. Однако, дифференциальная диагностика инфекции с помощью гистологии весьма затруднительна. Гистоморфология используется с другими лабораторными и клиническими тестами.

    Этот метод основывается на непосредственном обнаружении бледной трепонемы в исследуемом материале с помощью микроскопа и специальных приспособлений (чаще всего отделяемое эрозий и язв, реже спинномозговая жидкость и другие субстраты).

    С помощью скарификации, соскоба, сдавливания с эрозий и язвенных дефектов получают экссудат, затем исследуют в микроскоп подготовленный препарат.

    Обычно бледные трепонемы выявляют в препарате, полученном из шанкра, из очагов вторичного свежего, вторичного рецидивного сифилиса, а также пунктата лимфоузлов, плаценты.

    Основанный на феномене свечения мелких частиц в тёмном поле при попадании луча света (феномен Тиндаля), метод прекрасно позволяет дифференцировать возбудителя сифилиса от других трепонем на основании морфологических отличий и отличий в способах передвижения бактерии.

    Для микроскопии используют специальный темнопольный конденсор соответствующего оптического разрешения. Препарат получают способом раздавленной капли (каплю материала наносят на чистое обезжиренное предметное стекло и закрывают очень тонким покровным).

    На покровное стекло капают иммерсионное масло. С помощью поворота тубуса и поворота увеличивающей линзы регулируют нужное освещение.

    В тёмном поле микроскопа обнаруживаются клетки крови, эпителиальные клетки и сам возбудитель сифилиса. Бледная трепонема выглядит как спираль, очень тонкая, излучающая серебристый цвет, с плавными движениями.

    Рисунок 2 — Темнопольная микроскопия как способ визуализации бледной трепонемы в исследуемом материале. Источник иллюстрации — CDC

    Treponema pallidum необходимо отличать от других трепонем, в том числе и Tr. refringens, которая может содержаться в ротоглотке и на слизистой половых органов. Эта бактерия совершает хаотичные движения, имеет широкие и несимметричные, довольно грубые завитки. Кроме того, Treponema pallidum отличают от Tr. Microdentium, Tr. Buccalis и Tr. vincenti.

    Визуализация бактерий в тёмном поле иногда дополняется реакцией флюоресценции. Для этого меченые флюоресцирующим красителем противотрепонемные АТ добавляют в нативный материал. При этом образуется комплекс, называемый антиген-антитело (сокращенно АГ-АТ), который и является объектом для исследования с помощью люминесцентного микроскопа.

    ПЦР, разработанная в 1991 году для обнаружения молекулы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) бледной трепонемы, является высокочувствительным и специфичным, позволяет выявить фрагменты ДНК возбудителя.

    Базируется данный анализ на копировании коротких участков ДНК бледной спирохеты, который удовлетворяет заданным параметрам и присутствует в образце. Всё это выполняется в искусственных условиях (in vitro). Реакция проводится в приборе — амплификаторе, который обеспечивает периодизацию температурных циклов. Происходит охлаждение с последующим нагреванием пробирок с погрешностью в 0,1˚С.

    ДНК-матрицу прогревают в течение 2 минут при температуре 92-98˚С (максимальная температура используется, если полимераза термостабильна). При нагревании цепи ДНК расходятся из-за распада водородных связей между ними. В стадии отжига температуру реакции снижают для связывания праймера с одноцепочечной матрицей.

    Отжиг занимает около 30 секунд, в течение этого времени синтезируются сотни нуклеотидов. Вновь синтезируемые молекулы копируются полимеразой, в результате многократно увеличиваются специфические фрагменты дезоксирибонуклеиновой кислоты. Последующая детекция фрагментов проводится с помощью электрофореза в геле агар.

    ПЦР-диагностика сифилиса пока носит экспериментальный характер, но оправдана при выявлении врождённой инфекции, в сложных диагностических случаях или при минимальном содержании бледных трепонем в исследуемом материале.

    ДНК-гибридизация выполняется in vitro и основана на полном или частичном соединении двух одноцепочечных молекул ДНК в одну молекулу. В случае полного соответствия комплементарных фрагментов объединение происходит легко. Если комплементарное соответствие частичное, то объединение цепочек ДНК происходит медленно. На основании времени слияния цепей можно оценить степень комплементарности.

    При нагреве ДНК в буферном растворе разрываются водородные связи азотистыми основаниями, являющимися комплементарными, в результате цепочки ДНК расходятся. Далее получают препарат из двух денатурированных дезоксирибонуклеиновых кислот. При охлаждении одноцепочечные участки ренатурируют. Образуется так называемый гибрид ДНК.

    Метод позволяет оценить и анализировать скорость отжига, учитывая особенности (сходства и различия) ДНК между видами или внутри вида.

    Применение ДНК-зонда заключается в гибридизации меченого фрагмента ДНК со специфичным участком ДНК для идентификации комплементарных последовательностей нуклеотидов. Для метки зонда используется группа ненасыщенных атомов (хромофоры) или радиоактивные изотопы.

    ДНК–зонд применяют для гетерогенного и гомогенного детектирования нуклеиновых кислот. Роль зонда заключается в определении участков, на которых произошло слияние мишень-зонд. Детектирование в гомогенной системе имеет преимущество — позволяет отследить гибридизацию молекул ДНК в реальном времени.

    Суть метода сводится в денатурации ДНК и ренатурации (воссоединения цепочек ДНК). Процесс ренатурации нуклеиновой кислоты и ДНК-зонда заканчивается образованием «гибрида».

    Специфические последовательности нуклеиновых кислот гибридизуются с ДНК–зондом и, таким образом, выявляются и позволяют оценить количество ДНК в исследуемом материале.

    Высокая чувствительность кроликов к Treponema pallidum (порядка 99,9%) позволяет применять их в диагностике сифилитической инфекции.

    Заражение кроликов проводится в научно-исследовательских центрах и является «золотым стандартом» оценки чувствительности других методов.

    Вернёмся к трепонемным и нетрепонемным тестам, так как они используются чаще всего. Рассмотрим их преимущества и недостатки, а также ошибки в интерпретации результатов.

    Это тесты определения антител IgG и IgM к стандартизированному кардиолипиновому антигену. Их существенным недостатком является сравнительно небольшая специфичность.

    Низкая стоимость и простота выполнения позволяют отнести эти тесты к отборочным диагностическим, необходимым для установки предварительного диагноза и скрининга среди населения.

    Именно нетрепонемные тесты сдаются при оформлении медицинской книжки, устройстве на работу, постановке на учет в женской консультации.

    1. 1 Минимальная чувствительность в стадии сифилиса первичного – 70%;
    2. 2 Минимальная чувствительность в стадии сифилиса позднего – 30%;
    3. 3 Возможность появления ложноотрицательных и ложноположительных результатов;
    4. 4 Трудоёмкость выполнения РСК.
    1. 1 Относительно маленькая стоимость производства тестов;
    2. 2 Получение быстрого ответа;
    3. 3 Возможность их применения для скрининга.

    Получение ложноположительных или слабоположительных проб возможно в следующих случаях:

    1. 1 Нарушение технологии выполнения, при блокировании комплекса АГ-АТ.
    2. 2 Наличие у больного аутоиммунных заболеваний (ревматоидный артирит, ревматизм, склеродермия, системная красная волчанка, саркоидоз и др.).
    3. 3 Злокачественные новообразования.
    4. 4 Вирусные и бактериальные инфекции.
    5. 5 Эндокринные заболевания (аутоиммунный тиреоидит, сахарный диабет).
    6. 6 Беременность.
    7. 7 Употребление алкоголя.
    8. 8 Приём жирной пищи.
    9. 9 Старческий возраст.

    Как видно из списка, существует достаточно причин для неверного результата. Поэтому к нему следует весьма настороженно относиться. Рассмотрим наряду с РСК ещё две пробы. Это реакция микропреципитации и VDLR (ее модификация).

    Это проба, основанная на способности комплемента связываться с комплексами АГ-АТ. Идентифицируют образовавшийся комплекс с помощью гемолитической системы. Кардиолипиновый антиген заметно повышает чувствительность пробы.

    Чувствительной является и реакция Колмера, которая заключается в выполнении при различных температурных режимах. Так, первая фаза реакции Колмера протекает при температуре 20˚С в течение получаса, вторая фаза при тепературе 4-8˚С на протяжении 20-ти часов. За это время происходит связывание комплемента.

    При выполнении РСК возможно получение резко положительных результатов. Причиной, вероятно, является большой титр антител в неразведенной сыворотке. В этом случае пробы ставят с уменьшающими дозами.

    Для дифференцировки стадий сифилиса и оценки эффективности противосифилитического лечения определяют количество АТ в сыворотке.

    Позитивность пробы оценивают с помощью крестов, также в реакциях Вассермана, Колмера и Канна указывается разведение сыворотки.

    Так как трудоёмкость выполнения вышеуказанных проб велика, то для широты обхвата диспансеризацией разных групп населения разработан ускоренный способ серодиагностики сифилиса, так называемый экспресс-метод – реакция микропреципитации (сокращенно МР, РМП).

    Она выполняется с кардиолипиновым антигеном и вспомогательными веществами. Его преимуществом является забор периферической крови для исследования. Это значительно ускоряет и саму методику, и работу лаборантов.

    Рисунок 2 — Реакция микропреципитации (схема)

    Для проведения МР необходимы плазма или инактивированная сыворотка крови пациента (именно они содержат антитела). Далее плазму помещают в маркированные лунки. Затем, к исследуемому материалу добавляют каплю кардиолипинового антигена, смешивают и встряхивают. В итоге в сыворотке инфицированного появляются характерные хлопья, разные по степени интенсивности.

    Это качественная проба. При количественной оценке используются 10 разведений сыворотки, помещаемой в 10 лунок с соответствующей маркировкой. При качественной МР ответ указывается в виде крестов (плюсов) или минуса, при количественной указывается титр антител (1:2, 1:4 и так далее).

    Наличие хлопьев расценивается как положительный или слабоположительный ответ. Возможно появление флокулята и при отсутствии заболевания, поэтому окончательную оценку полученного результата проводят после контрольного исследования или проведения других реакций (РИБТ, РИФ, ИФА, РПГА).

    Рекомендованный Всемирной организацией здравоохранения метод постановки реакции с антигеном липоидной природы (АГ) по праву считается лучшим среди других стандартных нетрепонемных тестов. Разработан в США, штате Джорджиа в лаборатории венерических болезней (Veneral Diseases Research Laboratories).

    Аббревиатура учреждения послужила названием для пробы – VDRL. VDRL — это модификация МР. Сыворотку от больного сифилисом инактивируют и помещают на предметное стекло. Используемый антиген состоит из кардиолипина, холестерина и лецитина в разном процентном соотношении. Ответ регистрируется практически сразу.

    Отчётливая флокуляция возникает в присутствии в сыворотке антител. Сыворотка становится реактивна по прошествии 4-х недель после заражения. Для оценки количества антител, сыворотку предварительно разводят в геометрической прогрессии.

    1. 1 сравнительно высокая чувствительность;
    2. 2 сравнительно высокая специфичность;
    3. 3 легкость выполнения;
    4. 4 малая стоимость реактивов;
    5. 5 получение быстрого ответа.

    Недостатком VDRL является относительно высокая частота ложноположительных результатов.

    Их причинами являются всё те же перечисленные выше заболевания.

    Трепонемные тесты исполняются со специфическими АГ Treponema pallidum. Они необходимы и обязательны для установления окончательного диагноза. Это реакция иммунофлюоресценции (РИФ), реакции непрямой гемагглютинации (РПГА), иммуноферментный анализ (ИФА) и др.

    После положительного результата нетрепонемного теста (RPR, MP, VDRL) всегда должны выполняться трепонемные (чаще комбинация — РПГА, ИФА, РИФ).

    Трепонемные тесты более сложны в исполнении, чем экспресс-тесты, и требуют больших затрат денежных средств.

    Данная реакция (сокращенно РИФ) используется для диагностики сифилиса, в том числе и скрытых форм, и перепроверки положительных и ложноположительных проб.

    РИФ основана на свечении меченых антител при соединении с комплексом антиген-антитело под кварцевой лампой. Метод начал применяться в 60-х годах и отличался простотой выполнения и высокой специфичностью (которая немного уступает РИБТ).

    Он имеет несколько модификаций: РИФ-10, РИФ-200 и РИФ-abs.

    Наиболее чувствительна РИФ в разведении 10 раз, а остальные — более специфичны. РИФ проводится в двух фазах. К АГ добавляют сыворотку крови пациента. Образуется комплекс АГ-АТ, который исследуется в следующей фазе. Далее меченный с помощью флюоохрома комплекс идентифицируют при микроскопии. Если не наблюдается свечение, это указывает на отсутствие специфических АТ в сыворотке крови.

    РИФ-200 является наиболее ценным из всех разведений. Метод предназначен для диагностики различных форм сифилиса, особенно скрытого сифилиса и перепроверки положительных проб.

    Реакция иммобилизации бледных трепонем (сокращено РИБТ, РИТ) одна из сложных серологических проб, требующих значительных усилий и финансовых затрат. РИБТ применяют все реже, но актуальность ее сохраняется в диагностике скрытого сифилиса.

    Большое значение она несёт в распознавании ложноположительных результатов у беременных женщин и основывается на иммобилизации бактерий в присутствии иммобилизинов – поздних антител.

    Результат оценивается на процентном количестве (%) иммобилизированных трепонем с помощью специальной таблицы:

    1. 1 От 0 до 20 — отрицательная проба.
    2. 2 От 21 до 50 — слабоположительная проба.
    3. 3 От 50 до 100 — положительная реакция.

    Ложноположительные результаты также возможны при применении РИБТ. Так, неверный ответ возможен при инфицировании тропическими трепанематозами, а также, при туберкулёзе, циррозе печени, саркоидозе и пациентов старческого возраста.

    Этот анализ крови на сифилис называется реакцией пассивной гемагглютинации (сокращенно, кровь на РПГА, ТРПГА).

    Антиген для РПГА приготавливают из эритроцитов барана, покрытых фрагментами бледных трепонем (полученных от инфицированных кроликов (см. рисунок 4)). Для анализа используется венозная кровь (плазма или инактивированная сыворотка) пациента.

    При добавлении антигена в сыворотку пациента с сифилисом происходит образование комплекса АГ-АТ, который приводит к агглютинации эритроцитов. агглютинация определяется субъективно врачом-лаборантом.

    Рисунок 3 — Схема РПГА (реакция пассивной гемагглютинации)

    Проба оценивается как положительная при появлении агглютинатов равномерной розовой окраски. Окрашивание преципитата в красный свидетельствует об осаждении эритроцитов. РПГА является высокочувствительной и высокоспецифичной.

    Она является упрощённым вариантом РПГА. Отличается от пробы, описанной выше, меньшим количеством антигена, разбавителя и сыворотки крови для выполнения реакции. Через 4 часа после инкубации сыворотки можно оценить пробу. Используется при скрининговых и массовых обследованиях на сифилис.

    Иммуноферментный анализ (сокращенно ИФА) базируется на специфической реакции антиген-антитело. Биологический материал (сыворотка крови пациента, ликвор) вносят в лунки, на твердой поверхности которых фиксированы антигены бледной трепонемы. Исследуемый материал инкубируют, затем отмывают антитела, не связавшиеся с антигенами (см. рисунок 5).

    Идентификация полученного комплекса осуществляется на этапе ферментации с помощью иммунной сыворотки, меченной ферментом. При химической реакции фермент окрашивает полученные комплексы. Интенсивность окрашивания зависит от количества специфических антител в крови пациента и фиксируется спектрофотометром.

    Рисунок 4 — Схема ИФА (иммуноферментного анализа)

    Чувствительность ИФА составляет более 95% . Метод используется в автоматизированном режиме для исследования декретируемых групп населения: доноров, беременных и других, для уточнения диагноза при положительных и ложноположительных нетрепонемных тестах.

    Иммуноблоттинг – высокочувствительный метод, модификация простого ИФА. Реакция основана на электрофорезе с разделением антигенов бледных трепонем.

    Разделенные иммунодетерминанты переносят на нитроцеллюлозную бумагу и проявляют в ИФА. Далее инкубируют сыворотку и смывают не связавшиеся антитела. Полученный материал обрабатывают иммуноглобулинами (IgМ или IgG), меченными ферментом.

    В таблице 1 ниже мы привели возможные результаты анализов и их расшифровку. Как можно видеть в таблице, основное значение при расшифровке имеет комплексная оценка тестов.

    Таблица 1 — Расшифровка результатов серологических реакций (анализов крови на сифилис). Для просмотра кликните по таблице

    Оценка реактивности тестов выполняется также «крестами»:

    1. 1 Максимальный ответ (резко положительная проба) обозначается с помощью 4-х крестов.
    2. 2 Положительная проба обозначается с помощью 3-х крестов.
    3. 3 Слабоположительную реакцию обозначают двумя крестами.
    4. 4 Один крест свидетельствует о сомнительном и отрицательном результате.
    5. 5 Отрицательный ответ маркируют знаком «минус».

    Проблема оптимизации лабораторной диагностики сифилиса не потеряла свою актуальность до настоящего времени. Современные методы диагностики, несмотря на стремление учёных привести диагностику к максимально высоким показателям чувствительности и специфичности, требуют контрольной проверки и индивидуального подхода.

    Особенностью сифилитической инфекции является феномен серорезистентности, который так и не получил научного объяснения. Диагноз выставляется после полноценного обследования больного эпидемиологическими, клиническими, лабораторными методами.

    На фоне экономико-технического развития медицины наблюдается и прогресс в разработке новых критериев диагностики сифилиса. Всё это позволит быстро, успешно и безошибочно лечить пациентов.

    По материалам sterilno.net

    Анализ крови РПГА относится к классическим способам диагностики, которые применяются уже многие десятки лет, но по-прежнему актуальны. Для чего в настоящее время проводится РПГА? Почему его иногда предпочитают современным методикам, и когда может столкнуться обычный человек с необходимостью такого исследования?

    Наиболее современным методом современной лабораторной диагностики инфекционных заболеваний является полимеразная цепная реакция (ПЦР), которая позволяет определить в любом биологическом материале, от крови и до соскоба со слизистых оболочек остатки генома, или уникального наследственного кода возбудителя болезни. Вторым методом диагностики является определение иммуноглобулинов класса М и G в крови пациента, которые свидетельствуют о развитии специфического иммунного ответа.

    Этот способ исследования (реакция пассивной гемагглютинации, РПГА) имеет и второе название: реакция непрямой гемагглютинации (РНГА). И в практике может встретиться как аббревиатура РПГА, так и РНГА. Что это за анализ? Для него необходима центрифугированная сыворотка крови пациента, которую совмещают с особым диагностическим реагентом. Классически он называется «эритроцитарный антигенный диагностикум». Для его приготовления долгие годы использовались клетки красной крови, или эритроциты. Но так было сравнительно давно, а в настоящее время биологический материал уже не используют, и вместо этого применяют микроскопические частицы латекса.

    На эти частицы с помощью особой технологии наносят характерные для данного инфекционного возбудителя антигены, которые являются его «визитной карточкой». В результате получается множество частиц, на поверхности которых находятся адсорбированные, и крепко связанные с носителем активные молекулы антигена.

    В том случае, если в сыворотке крови пациента находятся выработанные к данному возбудителю антитела, то эти частицы латекса или эритроциты, склеиваются антителами между собой, и выпадают в осадок, который называется агглютинацией (переводе означает «склеивание»). Эту реакцию ставят в специальных планшетах, которые выполнены из пластика и рассчитаны на небольшие объемы. А раньше анализ крови на РПГА проводилась с набором обычных пробирок. В них в разных разведениях находилась кровь пациента, к которой и добавляли диагностикум.

    В некоторых случаях применяется зеркальный метод, когда диагностикум содержит не антигены, а антитела. Этот метод (РОНГА, или обратная гемагглютинация) применяется при поиске инфекции, при которых в крови циркулируют токсины, например при ботулизме. В таком случае, если у пациента в крови есть ботулотоксин, то он связывается со специфическими антитоксическими антителами диагностикумов, и также наблюдается реакция агглютинации, которую можно определить в зависимости от разведения сыворотки крови.

    Расшифровка складывается из самого факта агглютинации, и того максимального разведения сыворотки крови, при которой она еще уверенно определяется. Чем больше разведена кровь, при которой еще есть агглютинация, тем больше в организме пациента находится антител, и тем выше специфическая напряженность иммунитета при классическом проведении этой реакции. Наиболее часто используется разведения от 1:20 до 1:160 и выше. В настоящее время непрямую РНГА чаще всего используют для первичной диагностики сифилиса.

    Анализ крови РПГА — что это при сифилисе? Это проведение реакции в ее классическом виде, при которой у пациента в сыворотки его крови выявляются циркулирующие антитела к возбудителю сифилиса. Этот способ является недорогим, быстрым, и позволяет первично использовать исследовать биологический материал для скрининга этой инфекции, для обследования доноров, сдающих кровь, для контактных лиц, близко общавшихся с больными.

    Таким образом, РПГА при сифилисе является методом первичной неспецифической лабораторной диагностики. Но это вовсе не значит, что если такие антитела выявлены, то это анализ может считаться недостоверным. Выявление антител к бледной спирохете является основой лабораторной диагностики сифилиса и его подтверждения. И реакция пассивной гемагглютинации относятся к специфическим или трепонемный тестам, поскольку в нем используются «настоящие», сифилитические антигены.

    После того, как к специфическому диагностикуму добавляется сыворотка крови, больного сифилисом, то происходит гемагглютинация. Эти циркулирующие в крови антитела могут появиться уже через 2 недели после заражения. В этом случае речь идет об антителах «быстрого реагирования», или об иммуноглобулинах класса М. Через месяц они дополняются специфическими иммуноглобулинами класса G. Поэтому при начале заболевания эта реакция определяет только один вид антител, говорящих об острой инфекции, а во вторичном и третичном периоде сифилиса она «улавливает» антитела класса G, которых в крови накапливается довольно много. Именно поэтому чувствительность этой реакции при дебюте заболевания несколько ниже, а если человек болен сифилисом несколько лет, то ее чувствительность приближается к 100% против 86% в случае первичного, свежего и недавнего сифилиса.

    Эта реакция является высокоспецифичной и с ее помощью можно подтвердить или опровергнуть первичный диагноз, который был поставлен с помощью применения нетрепонемного теста. К таким нетрепонемным тестам относится RW или всем известная реакция Вассермана. При ее постановке в качестве антигена берется кардиолипиновый антиген, который не имеет никакого отношения к возбудителю. Он очень похож по своей структуре на сифилитический, но, все-таки, несколько отличается от него, и поэтому при этом виде исследования возможны ложноположительные реакции.

    Поэтому в том случае, если у пациента при реакции Вассермана выявлено положительное ее значение, то для подтверждения или опровержения результатов RW необходимо выполнить реакцию пассивной гемагглютинации. Специфичность РПГА составляет от 96 до 100%. Даже при скрытом сифилисе без всяких проявлений она может также поставить диагноз с практически 100% вероятностью.

    Поскольку правила диагностики сифилиса обязательно требуют переподтверждения первичного диагноза другим методом, то в том случае, если первичным методом диагностики является сама РПГА, то ее тоже необходимо переподтвердить, несмотря на ее высокую чувствительность, но уже только с помощью другого метода. И тогда используется тоже трепонемный тест, но только другой, например, нужно расшифровывать новые значения методом иммуноферментного анализа (ИФА).

    Поскольку антитела, принадлежащие к классу иммуноглобулинов G, сохраняются в сыворотке крови, как правило, пожизненно, то даже после активного и успешного лечения сифилиса с последующим выздоровлением эти антитела остаются положительными. Только в том случае, когда сифилис заподозрили и пролечили в «самом зародыше», через несколько дней после заражения, на стадии формирования твердого шанкра и регионарного лимфаденита, то тогда РПГА может быть отрицательной.

    Тот факт, что и при вторичном сифилисе, и при третичном РПГА будет одинаково положительной, то это значит, что такое исследование нельзя использовать для дифференциальной диагностики стадий заболевания. С помощью РПГА также невозможно оценить эффективность лечения, поскольку при этом антитела всё равно будут циркулировать в крови. Эффективность терапии необходимо оценивать с помощью других лабораторных анализов. Особенно высокие показатели, то и значительное разведение сыворотки крови пациента при проведении РПГА возникают при вторичном сифилисе, а также при ранней и скрытой форме этой болезни.

    Но, несмотря на высокую чувствительность и специфичность этого теста, также при проведении РПГА на сифилис возможны ложноположительные значения. Они возникают нечасто, не более чем в 2,6% случаев, и появляются при циркуляции в крови пациента антител, очень похожих на сифилитические, но не являющиеся ими. Это могут быть аутоантитела, и чаще всего такие «сюрпризы» подбрасывает системная красная волчанка.

    Также те заболевания, которые вызываются другими представителями трепонем, или спирохет, могут приводить к ложноположительным значениям, например, болезнь Лайма, которую вызывает «близкая родственница» сифилиса Borrelia burgdorferi. О диагностике болезни Лайма, или клещевого боррелиоза, можно прочитать здесь. В некоторых случаях, к таким искажениям приводит онкологическая патология, состояние беременности, и даже вялотекущий острый инфаркт миокарда. В последнем случае в кровь попадают частицы некротизированной сердечной мышцы, которые по своей структуре аналогичны кардиолипиновому антигену, он применяется для постановки реакции Вассермана, и извлекается из сердца крупного рогатого скота.

    Также причиной ложноположительных результатов могут быть случаи внутривенной наркомании, ВИЧ-инфекция и вирусные гепатиты B и C, лептоспирозы и возвратный тиф, а также заболевания, которые встречаются в жарких странах и вызываются трепонемами — пинта, фрамбезия, беджель. В редких случаях, у пациентов с низким иммунитетом могут активизироваться трепонемы, которые относятся к сапрофитам и обитают в полости рта. Также туберкулез и инфекционный мононуклеоз могут быть причиной таких реакций, как и в случае обширной политравмы и многочисленных переломов.

    Такие ложноположительные реакции необходимо перепроверять через некоторое время, обычно они исчезают в течение полугода, например, после разрешения беременности или в течение более длительного времени.

    По материалам myanaliz.ru

  • Понравилась статья? Поделить с друзьями:
    Adblock
    detector